谷氨酰胺对过度运动大鼠肠黏膜保护机制的实验研究.pdfVIP

口山东临清第一中学 曾爱侠 谷氨酰胺 (Glutamine，Gin)作为体 普通训练组和普通训练 +G1n组进行 管 内，混匀，离心(4oC，3000，1Omin)后取 血【 内含量最丰富的氨基酸，对人体细胞具有广 中等强度 的训练 。第 1周 ：每天完成 10m／ 浆 ，放入一80％低温冰箱待测 ；另一部分血 泛的保护作用 【1，2】。过度运动可导致肠黏 minX10min的跑 台运动 ；第2周 ：每天完 样收集于~IlA1％肝素(10ul／mlblood)的指形塑 膜屏障功能降低 ，加入外源Gin可明显改善 成10m／minX10min跑后，继续加速至15m／ 料管中，测量Hb和BUN的含量。采用氰化 肠道结构和功能完整性[3]，但关于Gln维护 minX10min；以后维持这一运动量直至第8 铁血红蛋白法测定Hb和二乙酰一肟法测定 肠黏膜屏障功能的具体机制尚未完全阐明 周末。 BUN，血浆TT~I]定采用放射免疫法测定，放 4【]。本实验采用模拟过度训练大鼠模型， 1．2．1 过度训练运动方式 免药盒由南京建成生物工程研究所提供，用 应用形态学手段结合免疫组化和放射免疫 过度训练组和过度训练 +Gin组进行持 LKBWallac1209型液体闪烁计数仪(瑞典)ff 技术 ，观测了Gln对过度训练状态下肠道形 续大运动量跑台 (BCPT一96型)训练8周 ，包括 数。 态、Ⅱ型磷脂酶A2(Ⅱ型PLA2)和溶菌酶分泌 一 般训练和力竭训练各4周。动物跑台坡度 1．3-3 电镜制样 等指标的变化 ，旨在进一步探讨Gin对过度 为10。，每周训练5天，周 日休息。 各组随机取3只大鼠，在乙醚麻醉下行 训练大鼠肠黏膜屏障功能的作用机理，为过 一 般训练 ：第 1周 ：每天完成 10nl／ Zamboni液心脏灌注固定后 ，取空肠近段2cm 度训练的防治及Gln的临床应用提供理论依 minX1Omin的跑台运动 ；第2周 ：每天完 处肠段行常规电镜制片观察。 据。 成10m／minX10min跑后 ，继续加速至15m／ 1．3．4 小肠黏液 Ⅱ型PLA2含量的测定 1 实验材料与方法 min×10min；第3周 ：每天进行10m／min、 小肠 Ⅱ型PLA2含量 的测定采用试剂盒 1．1 实验材料 15m／min、20m／min各 10min的持续跑 台训 法 ，操作过程完全按照试剂盒说明书进行 ， 1．1．1 试剂与仪器 练 ；第4周：每天分别进行 10m／min、15m／ Ⅱ型PLA2含量测定试剂盒由南京建成生物一厂 磷酸盐缓冲琼脂液系上海生化试剂二厂 min、20m／min、25m／min各10min的持续运 程研究所提供。 产品；IL—AA951型原子吸收分光光度计 ， 动。 1．3．5小肠粘液溶菌酶含量的测定 美 国；3551型酶标测试仪 ，美 国；TEM一 力竭性训练 ：从第5周起进行递增负荷 1．3．5．1制作标准曲线 2000EX型电子显微镜 ，日本 ；MD一20型图 跑台跑 ，每天以15m／min、20m／rain、25m／rain 取溶菌酶标准品1mg}f1]生理盐水1ml制 像分析仪 ，德国；ShjmadzuLC一6A高效液相 各10min运动后加速至30m／min、35m／rain各 成 1000XIg／ml，然后分别稀释成10XIg／ml、 色谱系统 ，日本 ；磺基水杨酸钠 (SSA)试管 20min运动，并不断递增跑速 ，直至大 鼠力 5 g／ml、2．5XIg／ml、 1．25 g／ml、0．625 g／