进出口中药材微生物学检验 征求意见稿.docVIP

ICS 01.040.13 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T XXXXX—2013 进出口中药材微生物学检验 Microbiological examination in traditional Chinese medicinal materials for import export （征求意见稿） 2013 - XX - XX发布 2013 - XX - XX实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准采用了传统方法对中药材中的微生物（包括：菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌的计数等）进行检测。 本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局、满洲里出入境检验检疫局、延边出入境检验 检疫局。 本标准主要起草人：罗雁非，刘韬，丁旭，赵庆松，肖建光，王宁，聂丹丹，王玮琳。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 进出口中药材微生物学检验 1 范围 本标准规定了进出口中药材中药材中的微生物（包括：菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等）的检测方法。 本标准适用于进出境中药材中的微生物（包括：菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌等）的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB 4789.1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 总则 GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB 4789.10 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数GB 4789.28 食品微生物学检验 SN/T 2099 进出口食品中绿脓杆菌检测方法 3 术语和定义 3.1 菌落总数 在一般情况下（如培养基、培养温度和培养时间）培养后，所得每克检样中形成微生物菌落总数。 3.2 大肠 广泛存在于人和温血动物的肠道中，能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气，IMViC（靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐）生化试验为＋＋－－或－＋－－的革兰氏阴性杆菌。以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性。 3.3 金黄色葡萄球菌 为一种革兰氏染色阳性球形细菌。显微镜下排列成葡萄串状，金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。 3.4 绿脓杆菌 亦名铜绿假单胞菌，具荚膜、鞭毛，为无芽胞的革兰氏阴性杆菌，能分解蛋白质，发酵糖类能力较低，能产生两种水溶性色素；一种是绿脓菌素，为蓝绿色的吩嗪类化合物，无荧光；另一种为荧光素，呈绿色。 3.5 沙门氏菌 革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌，散在，无荚膜和芽孢，是一大群寄生于人类和动物肠道内，生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。 3.6 霉菌 霉菌的菌丝呈长管、分枝状，无横隔壁，具多个细胞核，并会聚成菌丝体。霉菌可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。大量菌丝交织成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体。 3.7 酵母菌 是一种单细胞真菌，在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌。 4 仪器、材料 4.1 恒温水浴箱 36℃±1℃、±1℃、41℃±0.5℃、46℃±1℃、4±0.5℃； 4.2 显微镜 4.3 均质器及灭菌带滤膜的均质袋4.4 高压灭菌器 4.5 天平 0.1g； 4.6 全自动微生物生化鉴定系统4.7 微生物所用的玻璃器皿等（平皿、吸管、试管等）4.8 移液器4.9 恒温恒湿培养箱4.10 恒温培养箱 36±1℃、±1℃、41℃±0.5℃、28℃±1℃ 4.11 干烤箱4.12 生物安全柜4.13 灭菌的样品处理器具：剪子、镊子、勺子4.14 质控菌 大肠菌群ATCC、沙门氏菌ATCC、绿脓杆菌ATCC、金黄色葡萄球菌ATCC、ATCC紫外灯：波长360nm～366nm，功率≤6 W菌落计数器5 培养基和试剂5.1 无菌生理盐水磷酸盐缓冲液5.2 平板计数琼脂培养基 5.3 月桂基硫酸盐胰蛋白 5.4 肉汤（E.coli broth）5.5 缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲