抗体噬菌体展示技术研究进展.pdfVIP

维普资讯 第 25卷第 6期 同 济 大 学 学 报 (医学 版 ) Vo1．25No．6 2004年 12月 JOURNALOFTON6JIUNIVERSITY(MEDICALSC匝N ) Dec，2004 文章编号：1008—0392(2004)06—0530—03 抗体噬菌体展示技术研究进展 范建华 综述，成国祥 审校 (同济大学医学院病原生物学和免疫学教研室。上海 200092) 关键词：抗体工程；噬茵体；展示技术 中图分类号：Q78 文献标识码：A 抗体工程技术随着现代生物技术的发展而不断 体表面，被展示的多肽蛋 白可保持相对独立的空间 完善，并且是生物技术产业化的主力军，尤其在生物 结构和生物活性。 技术制药领域 占有重要地位。噬菌体抗体展示是利 噬菌体展示是一种基因表达和表达产物亲和选 用基因工程技术发展起来的一种模拟 自然免疫选择 择相结合的技术。常以一组随机多肽编码序列或基 系统制备抗体的新技术，与多克隆抗体和单克隆抗 因群体插入噬菌体展示载体，形成噬菌体展示文库。 体相比，噬菌体抗体展示技术的筛选范围从几千扩 其文库中，每个噬菌体粒子只展示一种序列的外源 增到几百万甚至几亿，而时间则从几个月缩短到几 肽链 ，不同噬菌体粒子展示不同序列 的外源肽链。 周，且操作简便，成本低廉 。一旦获得有效的噬菌体 可采用亲和选择方法，高效挑选出带有外源基因的 抗体，也就同时获得该抗体的基因。该技术可产生 重组噬菌体，并利用这些噬菌体再感染大肠杆菌，扩 单链抗体，其分子量只有天然抗体的五分之一，很容 增。还可从重组噬菌体DI 中切出外源基因再克 易通过细胞间隙到达靶细胞。本文就噬菌体抗体展 隆到其它宿主细胞中，经表达以获得大量外源基因 示的基础、优点及其前导技术在生物技术领域的应 产物。噬菌体展示已证明是一有力的技术 ，去获得 用作一综述。 可容纳几万甚至几亿的不同肽或蛋 白质的库 ，并已 应用于重组肽库 (识别肽受体配基)的亲和筛选，确 1 基 础 定单克隆抗体的抗原表位，选择酶作用底物以及筛 噬菌体抗体库 【·J(surfacedisplayphageanti— 选克隆的全套抗体。 bodylibrary)技术是近年来发展起来的一种抗体筛 2 优 点 选技术。其基本原理是采用 PCR等技术从小 鼠杂 交瘤细胞中获取抗体可变区重链和轻链基因，通过 利用抗体噬菌体展示技术构建和制备出的基因 一 段一段接头DNA拼接后，在与噬菌体头部蛋 白 工程抗体，与单克隆抗体相比，具有如下优点：(1) G3P等基因 5’段重组，通过噬菌体表面展示技术 通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体 surfacedisplay)把单链抗体 (singlechainFvSeEr) 对抗体的排斥反应；(2)基因工程抗体的分子量较 表达在噬菌体表面，与天然的抗体的折叠方式一样， 小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管 能与抗原有效结合。由于其筛选方式及产量明显优 壁，进入病灶的核心部位；(3)根据治疗的需要，制 势，所以取代传统的杂交瘤单克隆抗体技术已成趋 备新型抗体；(4)可以采用原核细胞、真核细胞和植 势 。 物等多种表达方式，大量表达抗体分子，大大降低生 噬菌体展