伏隔核毁损对大鼠MAP觅药行为及边缘区多巴安D-%2c2-受体的影响.pdfVIP

第三届全国精神外科学术研讨会论文集 伏隔核毁损对大鼠MAP觅药行为及边缘区多巴胺D2受体的影响 ● ★ 王晓峰刘建新李拴德张荣军邵威唐宗椿毛小林 。· (721004陕西宝鸡，解放军第三医院全军精神病外科治疗申d．渊 随着苯丙胺类药物的长期滥用，其精神依赖性和严重的毒性作用问题也日益突出。这不 仅给滥用者自身带来危害，也造成严重的社会问题。以往研究证明，中脑～边缘区多巴胺系 统(mesolimbic dopaminesystem，MLDS)在药物精神依赖性中起重要作用n1，其中，伏隔核 (nucleusaccumbens．NAc)在药物渴求的建立中起关键性作用乜1。本文利用条件性位置偏爱 (conditioned place 缘区多巴胺D2受体(dopaminereceptor2，DRDz)的影响，研究NAc毁损在MAP依赖戒断中 的治疗作用。、 ， 材料和方法 一、动物分组及CPP模型的建立‘ 提供)，单纯随机分为4组：对照组、模型组、假手术组和手术组(NAc毁损组)每组各20 只。实验前室内分笼饲养l周，自由进食、水，自然节律光照。CPP模型的建立采用倾向性 训练程序，即在本实验室条件下，测试大鼠的天然倾向。将偏爱盒中的隔板打开，把对照组、 模型组、假手术组和手术组大鼠放入两盒中间，让其在偏爱盒内自由活动及适应环境15min， 连续3天，记录第3天大鼠在每侧箱中的平均停留时间。本实验测得大鼠对黑色箱有天然 偏爱倾向。给药期：测试完天然倾向后的第2—8天给药。期间用隔板封闭黑白箱通道， 奇数天给模型组、假手术组和手术组大鼠MAP2．0mg·kg-1体重，对照组给同等剂量的生理 盐水，之后放入白箱60min。偶数天给生理盐水，然后放入黑箱60min，测试期第9天不给 大鼠任何药物，将中问隔板抬高12cm，使大鼠能在两盒之间自由活动。用CPP仪记录大鼠 15min内在黑白两箱中分别停留的时间，以在非偏爱箱(白箱)中的停留时间作为实验结 果。 ～ 二、手术方法 手术组大鼠CPP测试期第10日，以2％戊巴比妥钠腹腔麻醉后固定于动物立体定位仪上， 将齿杆调整至耳杆下3．3mm，无菌条件下切开皮肤，分离颅骨表面组织。用牙科钻钻开颅骨， 将电极插入到NAc，用直流电毁损仪进行毁损，毁损电流ImA。核团坐标：前囟前1．8mm、 -53- 大会交流 中线旁开1．2m、深距颅骨表面6．5mm，通电时间45s。术后以骨腊填补缺损颅骨，缝合皮 肤后，正常笼养。假手术组只做皮肤切开，分离暴露颅骨。术后7日恢复MAP给药及CPP 测试，测试期9d。 l；3原位杂交染色DRD。探针及原位杂交试剂盒购自武汉博士德公司。各组大鼠给予2％戊巴 比妥钠(40rag·kg’1)腹腔麻醉后开胸，经左心室灌注，先用100M生理盐水冲净血液，然 片采用多聚赖氨酸处理。切片经常规脱蜡至水。3％双氧水室温5-10分钟以灭活内源性酶。 蒸馏水洗3次。滴加3％柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml柠檬酸+2滴浓缩型胃蛋白酶，混 匀)，37或室温消化20分钟，原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。1％多聚甲醛 ／0．1M 20u u l加预杂交液。恒温箱38C4小时。吸取多余液体，不洗。每张切片加201杂交液， 加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38℃杂交过夜。 揭掉盖玻片，37C左右水温的2XSSC洗涤5分钟×2次；374C0．5×SSC洗涤15分钟X1 次：37℃0．2xSSC洗涤15分钟×1次。滴加封闭液：37C30分钟。甩去多余液体，不洗。