具有酪氨酸酶抑制作用的酵母多肽的分离纯化及分子量分布.pdfVIP

第43卷6期 应 用 化 工 Vo1．43No．6 2014年 6月 AppliedChemicalIndustry Jun．2014 具有酪氨酸酶抑制作用的酵母多肽的 分离纯化及分子量分布 吴悦，刘学，唐蔚 ，曹光群 (江南大学 化学与材料工程学院，江苏 无锡 214122) 摘 要：为确定具有较好酪氨酸酶抑制作用的酵母多肽的分子量，对酵母多肽粗制品溶液 以截 留相对分子量为 10KDa、5KDa、1KDa的超滤膜进行超滤，采用生化酶法对不同超滤组分进行酪氨酸酶抑制活性检测。结果显示， 各多肽组分的活性随相对分子量的减少而增大，活性多肽的相对分子量主要集中在 1KDa以下。对相对分子量 1KDa的多肽组分依次以DEAE-52阴离子交换柱层析法和SephadexG．15凝胶层柱析法进行分离，最后得到4 个洗脱组分，分别富集各洗脱组分并进行酪氨酸酶抑制活性研究。结果表明，组分 d一1活性最佳，其 Ic如值为 3．53mg／mL。经高效液相空间排阻色谱分析，d-1组分多肽的相对分子质量主要集中在200～800Da。 关键词：酵母多肽；酪氨酸酶 ；分子量分布；分离纯化 中图分类号：TQ936．1 文献标识码：A 文章编号：1671—3206(2014)06—1093一O4 Purificationandmolecularweightdistribution of tyrosinaseinhibitorfrom yeastpeptides Yue，LIUXue，TANG Wei，CAO Guang—qun (SchoolofChemicalandMaterialEngineering，JiangnanUniversity，Wuxi214122，China) Abstract：Inordertodeterminethemolecularweightdistributionofyeastpeptideswithtyrosinaseinhibi— tonfromyeastpeptides，thecrudeproductsofyeastpeptides(CPYP)solutionwassuccessivelyuhrafil— tratedwith 10KDa，5KDaand1KDauhrafiltrationmembrane．Thetyrosinaseinhibitionofeachfraction wasevaluated invitro．Resultshowedthatthelowermolecular—weightpeptidesfractionshowshigheractiv ityoftyrosinaseinhibition．Theulrtafiltrationfractionofhighactivity(MW 1KDa)wasfurtherpurified usingDEAE-52anionexchangechromatographyandSephadexG一15 gelfiltrationchromatography．Final— ly，fourfractionswereobtainedandtheirtyrosinaseinhibitionwasevaluatedrespectively．Theresultsindi— eatethatfractiond-1hashigherinhibitoryeffectontyrosinaseactivitywiththeIC50of3．53mg／mL．The molecularweightdistributionofthefractiond-1israngedfrom 200—800Da． Keywords：yeastpeptides；tyrosinase；molecularweightdistribution；purification 酪氨酸酶是一