Snail 在AP-1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用.pdfVIP

· 1172· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(6)：1172—1176 [文章编号] 1000-4718(2OLO)O6—1172—05 Snail在AP一1介导的肾小管上皮 细胞转分化中的作用 吕智美 ， 王 荣， 王 群 ， 完 强 (山东大学附属省立医院肾内科 ，山东 济南250021) [摘 要] 目的：探讨Snail在AP一1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用及对细胞外基质分泌的影响。 方法：将体外培养的人肾小管上皮细胞 (HK2)分为正常对照组、高糖组、AP一1阻断组。细胞免疫化学法检测E一 钙黏蛋白(E—cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达 ，ELISA法测定培养液上清中纤连蛋白(FN)的浓度变化，用 凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测HK2细胞AP一1的改变，RT—PCR法检测 vimentinmRNA和SnmlmR· NA的表达，Westernblotting检测 E—cadherin的表达。结果 ：高糖作用 HK2细胞48h后，高糖组FN浓度较正常对 照组显著增加(P0．05)，而AP一1阻断组浓度显著低于高糖组(P0．05)；高糖能够刺激 AP一1结合活性，AP一 1阻断剂可显著抑制AP一1的活化；高糖组SnailmRNA表达水平较正常对照组显著增加 (P0．05)，而AP一1阻 断组其水平显著低于高糖组(P0．05)；与正常对照组相比，高糖组E—cadhefin蛋白表达明显降低(P0．05)，而 AP一1阻断组其水平显著高于高糖组 (P0．05)；高糖组 vimentinmRNA和蛋白水平明显高于正常对照组 (P 0．05)，而AP一1阻断组显著低于高糖组(P0．05)。结论：高糖可导致肾小管上皮细胞 AP一1活化 ，诱导Snail表 达而下调E—cadherin，同时导致vimentin蛋白的表达、细胞外基质FN的分泌增加 ，诱导其表型转化 ，参与糖尿病肾 病的纤维化进程。 [关键词] 活化蛋白一1；Snail；肾小管上皮细胞 ；波形蛋白 [中图分类号] R583 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．06．025 RoleofSnailin therenaltubularepithelial—mesenchymal— transition mediatedbyactivatorprotein．．1 一 一 LUZhi—mei，WANGRong，WANGQun，WANQiang (DepartmentofNephrology，ProvincialHospitalAffliatedtoShandongUniversity，Jinan250021，China．E—mail：lvzhimei @126．con) ． [ABSTRACT] AIM：TostudytheroleofSnailintherenaltubularepithelial—myofibroblasttransdifferentiation andfibronectinsynthesismediatedbyactivatorprotein一1．METHODS：TheculturedHK2cellsweredividedintoth托e groups：normalglucosegroup(NG)，highglucosergoup(HG)andactivatorprotein一1(AP一1)inhibitedgroup(AG)． Concentrationoffibronectinintothe