糖尿病大鼠肾皮质细胞表型转化的探讨.pdfVIP

维普资讯 理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007,23(8)：164,5-1647 [文章编号] 1000—47l8(2007)08—1645—03 糖尿病大鼠肾皮质细胞表型转化的探讨 叶 迅 ， 李 红 ， 张晋红， 赵晓霞 (浙江大学医学院附属邵逸夫医院内分泌科 ，浙江 杭州 310003) [摘 要】 目的：探讨糖尿病大鼠肾皮质中波形蛋白(vimentin)、结蛋白(desmin)和转化生长因子 B (TGF— B。)表达的变化规律及其相互关系。方法：建立STZ诱导的sD大鼠糖尿病模型；用RT—PCR法检测造模成功后第 3、7、14、30、60和90d糖尿病大鼠肾皮质中vimentin、desmin和TGF—BmRNA的表达水平。结果：①糖尿病大鼠 肾皮质TGF—Bl和vimentinmRNA的表达分别从模型建立后第7d和第 14d起逐渐增多，desminmRNA的表达从 第 14d起逐渐减少，糖尿病大鼠和对照组大鼠相 比差异显著(PO．05，P0．O1)。②糖尿病大鼠肾皮质TGF—B。 和vimentin的mRNA表达呈显著正相关 ，TGF—B 和desmin的mRNA表达却呈显著负相关 ，desmin和vimentin的 mRNA表达也呈显著负相关。结论：糖尿病大鼠TGF—B在肾皮质局部表达增多可能促进肾小管上皮细胞向成纤 维细胞转化。 [关键词】 糖尿病肾病 ；表型；转化生长因子B；波形蛋白；结蛋白 [KEYWORDS] Diabeticnephropathies；Phenotype；Transforminggrowthfactorbeta；Vimentin；Desmin [中图分类号】 R363 [文献标识码] A 糖尿病肾病 (diabeticnephropathy，DN)是糖尿病严重而 照组腹腔注射等容量柠檬酸缓冲液。注射STZ-后48h和72h 主要的微血管并发症，是 目前导致终末期肾病的主要原因之 尾静脉取血测血糖 (葡萄糖氧化酶法)，血糖浓度≥l6．7mmol／L 一 。 DN的病理特征是肾小球硬化和肾小管间质纤维化。近 且尿糖持续3d+++大鼠确定为糖尿病大鼠模型 】。 年来的研究证明，肾小管上皮细胞表型转化在人类肾小球肾 2 样品收集 炎、肾间质纤维化中起重要作用…。成熟的肾小管上皮细胞 在各观察时点(造模成功后第3d、7d、14d、30d、60d和 的主要标志性结构蛋白是desminJ，肾间质细胞的标志性结 第90d)，各组随机取6只大鼠，称大鼠体重、收集尿液。以 构蛋白是vimentin，其与成纤维细胞形状和细胞移动能力密 股动脉放血法处死大鼠。采血分离血清。并立即取出肾脏， 切相关 。肾小管上皮细胞受损时可表现出较高的增殖能 称重、去除包膜，迅速将右肾冷藏于一8O℃冰箱。 力并表达vimentin，提示其具有向间质细胞转化的潜能。研 3 一般观察指标 究表明，在肾小球硬化及间质纤维化的慢性进展过程中，肾 生化常规酶法测定血糖 、血肌酐和尿肌酐水平 (日立 脏局部持续、过度表达的转化生长因子 (transforminggrowth 7170型全自动生化分析仪检测)；肌酐清除率(mL／min)=尿 factorbeta1，TGF—B。)除了能促进成纤维细胞和间质细胞 肌酐浓度 (p~mol／L)×每分钟尿量 (mL／min)÷血肌酐浓度 增殖外，还能诱导肾小管上皮细胞向肾间质成纤维细胞转 (pxnol／L)；肾脏肥大指数以肾重／体重比值 (g／kg)表示。 化 。然而，在糖尿病肾病 肾纤维化进展过程 中是否存在 4 逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)法半定量检测大鼠肾 类似的细胞表型转化 目前研究甚少。本研究探讨了糖尿病 皮质中TGF— 、vimentin和 desminmRNA 的表达水平 大鼠肾皮质局部结蛋 白(desmin)和波形蛋 白(vjmentin) Trl