重组大鼠肝再生增强因子抑制庆大霉素诱导的肾小管上皮细胞凋亡的机制研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiologv 2009，25(2)：367—372 · 367 · [文章编号] 1000—4718(2009)02—0367—06 重组大鼠肝再生增强因子抑制庆大霉素诱导的 肾小管上皮细胞凋亡的机制研究 张 玲 ， 刘 杞 ， 周 飞 ， 廖晓辉 (重庆医科大学 附属第二医院 肾内科 ，病毒性肝炎研究所，重庆 400010) [摘 要] 目的：探讨重组大鼠肝再生增强因子(rrALR)在体外对庆大霉素(GM)诱导的大鼠近端肾小管上 皮细胞 (NRK一52E细胞)凋亡的影响及其作用机制。方法 ：将NRK一52E细胞分为正常对照组、庆大霉素处理组 (GMI．6g／L)和 rrALR干预组(分别加入 GM和不 同浓度的rrALR)，培养细胞 24h、48h。吖啶橙／溴乙啶 (AO／EB)染色、DNA琼脂糖凝胶电泳及AnnexinV／PI双染流式细胞术检测各组细胞的凋亡状态。Westernblotting 和RT—PCR检测各组细胞不同时点 Bcl一2和 Bax蛋 白、mRNA的表达。结果：(1)rrALR对庆大霉素诱导的 NRK一52E细胞凋亡具有抑制作用 (P0．05)。(2)rrALR能够呈剂量依赖方式增加细胞 Bcl一2蛋白及核酸的表 达(P0．05)、降低细胞Bax蛋白及核酸的表达 (P0．05)，使 Bcl一2／Bax比值升高(P0．05)。结论：rrALR可 以通过调节Bcl一2家族 Bax和 Bcl一2蛋白及核酸的表达水平，抑制庆大霉素诱导的肾小管上皮细胞凋亡 ，减轻肾 毒性药物对小管上皮细胞的损伤。 [关键词] 肝再生增强因子；。肾小管上皮细胞 ；庆大霉素类 [中图分类号] R692．6 [文献标识码] A M echanism responsibleforinhibitoryeffectofrecombinantrataugmenter ofliverregeneration on renalturbularepithelialcellapoptosisby genta- mycln ZHANGLing，LIUQi，ZHOUFei，LIAOXiao—hui (DepartmentofNephrology，InstituteofViralHepatitis，TheSecondAffiliatedHospital，ChongqingMedicalUniversity， Chongqing400010，China．E—mail：lindazhang8508@hotmail．COrn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofrecombinantrataugmenterofliverregeneration(rrALR)on印- optosisofrenaltubularcells(NRK一52Ecells)inducedbygentamycinsulfate(GM)．METHODS：Thecultured NRK一52Ecellsweredividedintofourgroups：normalcontrolcells，cellswithGM (GM1．6s／L)orGMandrrALR(15 mg／Lor25mg／L)treatments．Theapoptosisofculturedcellswereassessedat24h，48hbyAO／EBstaining，DNA agraosegelelectrophoresisanalysisandflowcytometryusingAnnexinV—FITCandpropidiumiodide(PI)staining．The proteinandmRNAexpressionsofBcl一2nadBaxweredetectedbyWesternblottingandRT—PCR，respectively．RESULTS： (1)rrALRinhibitedNRK一52EcellsapoptosisinducedbyGM (P0．05)．(2)rr