重组结缔组织生长因子对大鼠血管外膜成纤维细胞表型转化的影响.pdfVIP

维普资讯 理生理杂志 ChineseJournalofPath [文章编号] 1000—4718(2006)l2—2317—05 重组结缔组织生长因子对大 鼠血管外膜 成纤维细胞表型转化的影响 车在前， 高平进， 姬开达， 朱鼎良 (上海交通大学医学院附属瑞金医院，上海市高血压研究所 ，上海 200025) [摘 要] 目的：克隆和构建带大鼠结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体peDNA3．1(+)／CTGF，并 观察其对血管外膜成纤维细胞 (AF)表型的影响。方法：以AF总RNA为模板，进行逆转录一聚合酶链反应 (RT— PCR)，获得CTGF的cDNA，克隆入peDNA3．1(+)载体，酶切和测序鉴定重组子。将构建好的peDNA3．1(+)／CT- GF用脂质体法转入AF细胞。Westernblotting观察CTGF的表达。同时观察转染 peDNA3．1(+)／CTGF对细胞表 型的影响。结果：成功构建大鼠CTGF基因的真核表达载体 peDNA3．1(+)／CTGF．并证明其能在真核细胞内表 达。转染peDNA3．1(+)／CTGF可以诱导AF表型转化。结论：重组结缔组织生长因子可诱导大鼠血管外膜成纤 维细胞表型转化。 [关键词] 结缔组织生长因子；血管外膜；成纤维细胞；表型转化 [中图分类号] R363 [文献标识码] A Effectofrecombinantconnectivetissuegrowth factoron thephenotype transitionofratadventitiafibroblasts CHEZai—qian，GAOPing—jin，JIKai—da，ZHUDing—liang (RⅡ枷 Hospital，ShanghaiSecondMedicalUniversity，ShanghaiInsthuteofHypertension，Shanghai200025，China． E—mail：chezaiqian@sohu．com) [~ STSACT] AIM：ToconstructpcDNA3．1(+)／connectivetissuegrowthfactor(CTGF)eukaryoticexpression plasmidandtoinvestigateitsroleinthepromotionofphenotypictransitioninadventitiafibmblasts(AF)．METHODS： TheexpressionvectorpeDNA3．1(+)／CTGFwasconstructedbyroutinemoleculebiologicalmethod．TheexpressionVce- torpeDNA3．1(+)／CTGFwasconfirmedbyrestrictionenzymedigestionandsequencingmethod．Theexpressionvcetor peDNA3．1(+)／CTGFwastransfectedintoAFnadtheexogenousexpressionwasobservde．Theexpressionofthea—SM actinWas examinedbyW estern blotting．RESULTS：TheeukaryoticexpressionvectorofCTGF wassuccessfullycon- structed。whichWas transfectedintoAF，theexpressedCTGF promotedphenotypetransition inAF．CONCLUSION ： ThepeDNA3．1(+)／CTGFplasmidWas constructedandtransfectedintoAF，hteexpressedCTGFpromotedphenotype transitioninAF． [KEYWORDS] C