实时荧光定量PCR技术在群体感染性腹泻病原体快速筛查中的应用.pdfVIP

维普资讯 中国卫生检验杂志2008年6月 第 18卷 第6期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology．Jun2008：Vol18 No6 【论著】 实时荧光定量PCR技术在群体感染性腹泻病原体快速筛查中的应用 雷永 良，叶碧峰，梅建华，柳付明，陈莎彬，兰进权 ，李永芬，陈秀英 (浙江省丽水市疾病预防控制中心检验科，浙江丽水 323000) [摘要】 目的：建立快速筛查感染性腹泻标本的实时荧光定量 PCR法，考察其在群体感染性腹泻病原体快速筛查中的 应用。方法：采用国家标准的细菌培养法 (或传统ELISA法)对2006年丽水地区发生的总计 14起共487例群体感染性 腹泻标本进行病原体筛查，同时采用实时荧光定量PCR方法对该487例标本进行检测，比较两者的实验结果，并考察实 时荧光定量PCR方法的特异性和灵敏度。结果：实时荧光定量PCR检测结果与传统检测方法的符合率为97．54％，除完 全符合的278例标本之外，另有7例采用传统方法检测为阴性的标本用实时荧光定量PCR检测显示为阳性 ，表明实时荧 光定量PCR方法具有更高的灵敏度；特异性和灵敏度实验表明实时荧光定量 PCR方法的特异性达 100％，灵敏度为 10 拷贝／ml。结论：实时荧光定量PCR法具有准确性好、灵敏度高、检测快速等优点 ，是一种理想的群体感染性腹泻病原体 快速筛查的方法 。 [关键词] 实时荧光定量PCR；感染性腹泻；快速筛查 [中图分类号] Rl15 [文献标识码] A [文章编号] 1004—8685(2008)06—1000—04 Utilityofreal——timefluorescentquantitativePCR forrapidpathogenscreeninginpopula-· tionofinfectiousdiarrhea LeiYong一n，，YeBi-reng，MeiJian—hua，LiuFu-ming，ChenSha—bin，LanJin—quan，LiYong-fen，ChenXiu-ying (LishuiCenterforDiseaseControlandPrevention，Lishui323000，China) [Abstract] Objective：Toestablishthemethodofreal—timefluorescentquantitativePCR(qPCR)andtoexamineitsutilityfor rapidpathogens screeninginpopulationofinfectiousdiarrhea．M ethods：Therewere487specimensof14infectiousdiarrheaout— breakeventsoccurredinLishuiduring2006．whichwereexaminedbyculturemethodofNationalStandards(ortraditionalELISA method ，f0rvirus)andcomparedwiththeqPCRmethod．Results：TheresultofqPCRwas97．54％ as comparedwithtraditional methods．Therewere278specimensdetectedtobepositivebybothtraditional andqPCR method s．Besides．7traditional—method — negativespecimenswere detectedtobepositivebyqPCR．suggestingahighersensitivity．nleabsolutespecificityandsensitivity of qPCR were100％ and 10 copies／ml，respcetively．Conclusion~qPCRmethodisideal ofrrapidpathogenscreeninginpopula— tionofinfectiousdiarrheabecauseofitshighaccuracyandsensitivi