瓜实蝇热激蛋白基因hsp70的克隆及序列分析.pdfVIP

南方农业学报 JournalofSouthernAgriculture 2015，46(5)：800—805 ISSN2095—1191；CODEN NNXAAB http：／／www．nfnyxb．cn DOI：10．3969~：issn．2095-1191．2015．5．800 瓜实蝇热激蛋白基因厶sp7啪 克隆及序列分析 姜建军 ·，王凤英 ，黄立飞 ，陈红松 ，李 磊。，杨 朗 (广西农业科学院 植物保护研究所／广西作物病虫害生物学重点实验室，南宁 530007； 中国热带农业科学院 环境与植物保护研究所，海口 571101) 摘要：【目的】克隆分析瓜实蝇热激蛋白j1sp70基因序列特征，为进一步研究瓜实蝇的热适应性机制及制定综合防 治策略奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中已报道的昆虫由sp7O基因保守序列，设计合成扩增瓜实蝇hsp70~：因部分 片段的简并引物，并利用RACE．PCR扩增其全长序列。 【结果】克隆获得瓜实蝇hsp7D基~[cDNA全长序列(获取号： KM112021)2271bp，含l911bp的开放阅读框，编码636个氨基酸 ，具有真核生物】】sp70基因家族的3个明显基序标签， 同时在c．末端具有EEVD基序，推测其属于胞质型热激蛋白。BLAST分析结果表明该序列与双翅 目实蝇科昆虫hsp07 基因高度相似，最高相似度达91％。氨基酸序列系统发育分析结果显示 ，瓜实蝇与双翅 目实蝇科昆虫聚类为一个分 支，证实hsp70~因的高度保守。【结论】瓜实蝇hsp7O基因具有真核生物hsp70~因家族的特征，序列表现为高度的保守 性，可作为今后研究瓜实蝇抗逆性机制的一个参数指标。 关键词：瓜实蝇；热激蛋白70基因；RACE～PCR；序列分析 中图分类号：$436．5 文献标志码：A 文章编号：2095—1191(2015)05—0800—06 Cloningandseq]uueenncceeaannaallyyssiissofhIieeaattsshIiooccKkPprrootteelinn7／00ggene (hsp70)from BactroceracucurbitaeCoquillett JIANGJian-jun，WANGFeng—ying，HUANGLi-fei，CHENHong-song， LILei，YANG Lang (1PlantProtectionResearchInstitue，GuangxiAcademyofAgriculturalScienees／GuangxiKeyLaboratoryofBiologyforCrop DiseasesandInsectPests，Nanning530007，China；EnvironmentandPlantProtectionInstitue，ChineseAcademy ofTropicalAgriculturalSciences，Haikou571101，China) Abstract：【Objective】Thepresentexperimentwasconductedtocloneandanalyzeheatshockprotein70gene(hsp70 gene)from BactroceraCUCUrbitaeCoquilletttolaythefoundationforfurtherstudyonheatadaptabilitymechanism ofB．eu— eurbitaeandmakingcomprehensivepreventionandcontrolstrategy．M【ethods】Basedontheaminoacidsequenceofinsect hsp70from NCBI，thede