川芎嗪对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的防治作用.pdf

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摘要 摘要 目的: 本研究利用博莱霉素导致的肺间质纤维化大鼠作为模型,研究川芎嗪对肺间质纤维 化的防治作用及其发病机制。 方法: 80 只健康清洁级雄性SD 大鼠随机分为4 组:正常组、模型组,阳性药物组 (醋酸 强的松)和川芎嗪组,每组 20 只。术后第二天开始灌胃给药,阳性药物组给予醋酸强 的松 1.5mg/kg/d ,川芎嗪组给予川芎嗪 20mg/kg/d ,模型组给予等体积的生理盐水。实 验期间,大鼠自由饮水和进食,给药 14d 后,每组随机取 10 只动物处死,取肺组织, 给药28d 后处死其余动物,检测以下指标:称量大鼠体重、肺组织重量比较体重变化和 肺系数;应用生化试剂盒检测SOD,GSH-Px ,MDA 和iNOS 在肺组织中的表达;制作 肺组织石蜡切片,进行HE 、Mallroy 染色;制作肺组织冰冻切片,进行 caspase-3 免疫 组化染色和端粒酶TERT 原位杂交染色。 结果: 1 光镜下 HE 染色结果:14d,正常组终末细支气管、呼吸性细支气管、ⅠⅡ型肺 泡细胞结构正常。模型组出现了大量的纤维增生灶和实变区。阳性药物组炎症和纤维化 灶交错,部分小支气管周围可见实变区。川芎嗪组也表现出炎症和纤维化灶。28d ,正 常组结构未见异常。模型组大鼠纤维化程度明显,有大片实变区,支气管周围纤维化程 度较高。部分肺泡壁明显增厚,肺泡结构紊乱,肺泡间隔纤维化病灶显著。部分肺泡腔 扩张呈囊状,肺泡壁断裂,肺泡腔萎陷。阳性药物组情况有所好转,肺泡间隔纤维化程 度不高,比模型组间隔宽。支气管周围仍可见纤维病灶,部分肺泡及细支气管内可见散 在的炎性细胞。川芎嗪组情况明显好转,肺泡间隔纤维增生灶较少,肺泡内未见明显的 炎性细胞。细支气管周围的纤维化程度明显低于模型组及阳性药物组。 2 Mallory 染色结果:14d、28d ,正常组仅在小支气管周围及肺泡间隔存在少量的胶 原纤维。14d,模型组增厚的肺泡间隔,小支气管周围均有蓝色胶原纤维增生。川芎嗪 I 摘要 组肺泡间隔,小支气管周围仅有少量胶原纤维增生。阳性药物组胶原含量介于模型组和 川芎嗪组之间。 28d ,模型组,大鼠肺泡壁及间隔,小支气管周围,小支气管管壁均有大量蓝色胶 原纤维增生。阳性药物组增厚的肺泡间隔,小支气管周围胶原含量较高。川芎嗪组纤维 化程度低,胶原含量较少,仅在部分小支气管周围有少量胶原。 3 生化指标测定结果:与正常组相比,模型组大鼠肺组织中 SOD 和 GSH-Px 活性 下降,MDA 水平明显升高。与模型组相比,川芎嗪能调节肺纤维化大鼠体内的自由基 代谢,升高大鼠体内SOD 和GSH-Px 活性,降低MDA 水平。模型组大鼠肺组织内的iNOS 活性高于正常组,用川芎嗪治疗肺纤维化大鼠后,大鼠肺组织的iNOS 活性有一定程度 的降低。其中模型组14d 与28d 相比,具有统计学意义,而川芎嗪组14d 与28d 相比, 也具有统计学意义。 4 caspase-3 免疫组化染色结果: 正常组大鼠肺组织caspase-3 几乎不表达;模型组14d、28d 大鼠肺组织小支气管上 皮细胞均出现了强阳性表达,部分肺泡上皮也有表达。阳性药物组和川芎嗪组14d、28d 肺组织小支气管上皮细胞也出现了阳性表达,但川芎嗪组28d 肺组织小支气管上皮细胞 呈现弱阳性表达。 5 端粒酶TERT 原位杂交染色结果: 端粒酶TERT 正常组在大鼠肺组织部分小支气管周围有少量表达,其它部位基本不 表达。模型组 14d、28d 肺组织小支气管周围均出现了强阳性表达,部分肺泡上皮也有 表达。阳性药物组和川芎嗪组 14d、28d 肺组织小支气管周围也出现了阳性表达,但川 芎嗪组28d 肺组织小支气管周围呈现弱阳性表达。 结论: 1 川芎嗪能调节肺纤维化大鼠体内自由基水平,减轻自由基对肺组织结构的氧化损 伤,对特发性肺纤维化起到防治作用。 2 川芎嗪可以减少肺纤维化大鼠肺组织中 caspase-3 的表达,其机制可能与减轻肺 泡上皮细胞凋亡有关。 3 川芎嗪可以通过抑制肺组织中端粒酶TERT mRNA 的表达,从而起到防治肺间质 纤维化的作用。

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