CP节律性化疗对人脐静脉内皮细胞及其中自噬相关蛋白Beclin1、LC3的影响.pdfVIP

236 武警医学 2015年 3月 第26卷 第 3期 MedJChinPAPF，Vo1．26。No．3，March。2015 CP节律性化疗对人脐静脉 内皮细胞及其中自噬相关蛋 白 Beclinl、LC3的影响 郭列平 ，周 帆 ，石昊天 ，陈海敏 ，凌晨晖 ，陈小玲’，侯 健 摘【要】 目的 研究持续低剂量磷酰胺氮芥 (phosphoamide，PM)联合泼尼松龙(cP节律性化疗方案)对人脐静脉 内皮 细胞 (humanumbilicalveinendothelialcells，HUVEC)自噬相关蛋 白Beclinl和 LC3表达水平的影响，探讨节律性化疗增加 HU— VEC对化疗药物敏感性的机制。方法 实验分DMSO对照组、磷酰胺氮芥 (PM)组、泼尼松龙组、磷酰胺氮芥 +泼尼松龙组 (CP组)，每组重复3次。采用不同的药物处理 HUVEC，用CCK8法检测细胞增殖 ，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫印迹法和 反转录PCR检测自噬相关蛋白的表达水平。结果 (1)与 DMSO对照组相比，随着时间的延长，PM、泼尼松龙及 CP组均使 HUVEC的增殖抑制率明显升高(P均 0．001)，并且在相同作用时间，不同组的药物对细胞的增殖抑制率也明显不同，泼尼松 龙组对细胞的抑制率最低 ，而CP组对细胞的增殖抑制率 (72h，25．1％±0．7％)最高，PM组 (72h，20．4％ ±0．7％)次之 (P均0．01)；(2)用药处理48h后，与 DMSO对照组相比，泼尼松龙组、PM组、CP组使 HUVEC细胞的凋亡率依次增高 (P均 0．001)；(3)用药处理48h后，与DMSO对照组相 比，泼尼松龙组、PM组、CP组的Beclinl、LC3的蛋 白表达和mRNA表 达水平均依次下降(P均0．001)。结论 人脐静脉内皮细胞 HUVEC经 CP节律性化疗方案处理后 ，可以显著降低 HUVEC 细胞的增殖水平，促进 HUVEC细胞的凋亡 ，并显著降低 自噬相关蛋白Beclinl和LC3的表达水平。 【关键词】 节律性化疗；自噬相关蛋白；Beclin1；LC3 【中国图书分类号】 R733 EffectofCP metronomicchemotherapyon HUVEC cellsand autophagy-relatedprotein BeclinlandLC3 GUO Lieping ，ZHOU Fan ，SHIHaotian ，CHEN Haimin ，LIN Chenhui，CHENXiaoling，andHOUJian 2 ． 1．Department ofHematology andOncology，ShanghaiZhabeiDistrictCen~al Hospital，Shanghai200070，China；2．DepartmentofHematology， ChangzhengHospital，theSecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200003，China 【Abstract】 Objective ToinvestigatetheeffectofCPmetronomicchemotherapyonHUVECcellsandautophagy—relatedpro— tein，BeclinlandLC3，expressionlevels，nadtoexplorethemechanism ofCPprogram increasingsensitivityofHUVECceilstoche— motherapeuticdrug．Methods SubjectsweredividedintotheDMSOcontrolgroup，nadhtephosphoramidemustard(PM)group，the prednisolonegroup，thephosphoramidemustardandprednisolonergoup(theCPgroup)．HUVECcellsweretreatedwithdifferent dmgs．CCK8methodwasusedtodetectcellproliferation，flow cytometry todetecthtecellapoptosis，WesternblotandR