x射线照射鼻咽cne1细胞后mre11蛋白表达的初步研究.pdf

1 X射线照射鼻咽癌CNE1细胞后MRE1蛋白 表达的初步研究 硕士生姓名：王 慧 指导教师：王若雨 教授 指导小组：高文斌 教授 专业名称：肿瘤学 摘 要 肿瘤DNA损伤修复是放疗失败的主要原因。电离辐射造成细胞DNA 损伤类型包括脱氧核糖变化、碱基变化、DNA单链断裂、DNA双链断 (double．stranded breaks，DSBs)是最严重的损伤，导致细胞失去分裂 增生能力而死亡，是电离辐射致肿瘤细胞死亡主要机制。DNA双链损伤修 复在正常细胞中，可增强放疗靶区中正常组织的耐辐射能力，但在肿瘤 细胞中，可能导致肿瘤局部复发和转移。修复机制包括同源重组修复 recombination (homologous end 复中发挥重要作用。其中MREll的N端具有4个保守的磷酸酯酶区域， C端有2个DNA结合区，并具有单链／双链核酸内切酶的活性和3’一5’ l相互作 核酸外切酶活性，能识别并结合到DSBs处，与RADS0、NBS 用共同完成修复…。研究X射线照射后肿瘤细胞中MREll基因及其蛋白 表达的规律，并探讨其与肿瘤放疗失败的相关性，为提高肿瘤放射治疗 疗效开辟新途径，提供新的靶点。 目的：鼻咽癌细胞株CNE 照射后4小时时间点各组MREIlmRNA表达与未照射组比较，观察射线 2h、24h后MREl 4h、6h、8h、1 1蛋白的表达变化。从基因和蛋白水平 1基因及其蛋白的表达改变。 探讨了鼻咽癌细胞株CNEl经照射后MREl 方法：选取人鼻咽癌CNEl细胞株进行体外培养及X线照射。按单 于第0h、1．5h、4h、6h、8h、l2h、24h时间点收集固定，利用免疫荧光 Plus 技术检测MREll蛋白的表达，并采用Image．Pro5．O软件分析测定 各组荧光的平均光密度值(mOD)。 线照射后4小时枷EJ 间点MREl1蛋白的表达，由荧光强度表示和平均光密度(mOD)表示。 发现荧光强度先增强后减弱，4小时荧光强度最强。各组mOD分别 l 9．57、721．5士1 38．7+24．91、238．1±l 4h、6h、8h、1 2h组与Oh组比较，P0．05，MREl1蛋白表达差异有统计 学意义；24h组与Oh组比较，P0．05，差异无统计学意义。 关性。但CNEl细胞株经X线照射后MREll蛋白的表达随时间的延长 先增强后减弱，且在照射4小时表达最强，24小时后恢复到未照射水平。 MREl 关键词：X线照射 CNE1细胞DNA双链损伤 1蛋白 2 The ofMREl1ProteininCNElcells expression after irradiation X··ray Master Hui candidate：Wang degree WangRuo—yu SupervisorProfes