转化生长因子1成纤维细胞thy-1，caveolin-1表达的改变及其在肺纤维化中的意义.pdfVIP

·中文论著摘要· 的改变及其在肺纤维化中的意义 刖 菁 要的一员，具有多种生物学功能。最近研究提示caveolin．1与肺纤维化关系密切。 成纤维细胞是肺纤维化主要的生物合成细胞，近年来的研究表明，成纤维细胞是 一个异质性的群体，根据细胞表面蛋白thy一1可以将成纤维细胞分为thy．1+和 thy．1一两个亚组，两亚组在诸多方面具有不同的特性，但是两个亚组caveolin．1蛋 白的表达是否相同目前国内外尚无报导。本研究目的是从体外方法研究NIH／3T3 成纤维细胞在致纤维化因子的刺激下caveolin．1表达水平的变化以及不同亚组 caveolin．1表达的差异。博来霉素是肺纤维化模型是经典的模型，我们同时检测 纤维化动物模型中的变化意义。 材料与方法 一、材料 1、NIH3T3成纤维细胞株 2、转化生长因子131 3、caveolin．1抗体 4、thy．1抗体 5、DMEM培养基 6、胎牛血清。 7、wistar大鼠 二、方法 1、流式细胞术 2、荧光激活细胞分选技术 3、免疫印迹技术 4、免疫组化技术 实验结果 间和剂量依赖性。 2、TGF—beta 1并不能导致NIH3T3成纤维细胞thy—l表型改变。 3、Thy一1+亚组较thy-1一亚组caveolin一1表达水平明显升高。 4、随着纤维化进展，caveolin．1表达水平呈下降趋势。 讨论 肺纤维化是一种进展性、致死性的疾病。成纤维细胞是主要的生物合成细胞， 具有异质性。根据表面蛋白thy-1利用荧光激活细胞分选技术将成纤维细胞分为 胞表面穴样内陷的重要组成部分，参与了多个系统、多种疾病的发生发展。我们 首次探讨了两亚组cav一1表达水平，发现thy一卜亚组高于thy一1+亚组，初步推 测thy一卜亚组对于致纤维化因子的高反应性可能与car-1的低表达有关，进一 步的验证可以通过siRNA或者腺病毒转染的方法验证。成纤维细胞的异质性不仅 表现在不同亚组对不同刺激反应性不同，而且不同部位、不同疾病的成纤维细胞 thy一1表达本身也有所不同。气管内滴注博来霉素是肺纤维化的经典模型，通过 免疫组化对肺纤维化模型不同时期car-1的变化做了初步的探讨，表明肺纤维化 的进展中同样伴随了cav一1的表达变化，进一步的研究会对疾病的发病机制和治 疗提供新的思路。 结论 基于thy-l蛋白的两亚组成纤维细胞cav一1基础表达水平不同，thy．1．亚组对 于致纤维化因子的高反应性可能与cav．1的低表达有关；不同的成纤维细胞thy．1 阳性率不同，对于致纤维化因子的反应性亦有差异，进一步说明了成纤维细胞的 2 异质性；Cav-1参与了肺纤维化的发展过程，恢复或增加cav．1生物活性的治疗措 施可能有助于恢复上皮细胞的正常再生过程和延缓纤维化的进展。 关键词 成纤维细胞；thy．1；小窝蛋白1 ·英文论著摘要· Theeffectof factoron transforminggrowthp一1 thy一1， andits in fibrosis caveolin·-1implicationspulmonary Preface Caveolin一1isoneofthemost memberofa ofmembrane important family proteins thatarethe