油茶粕蛋白质的离提取、理化性质及体外消化产物的抗氧化性研究.pdfVIP

摘要 摘要 我国是油茶产量大国，目前油茶的开发利用多集中于压榨茶油，而榨油后 的油茶粕利用率极低，不仅造成了资源的浪费，而且带来带来一定的环境压力。 油茶粕中含有大量的生物活性成分，具有一定的生理功能。因此，研究这些活 性成分并加以利用，对提高油茶粕综合利用率具有重要的现实意义。本文对油 茶粕中的蛋白质做了较为系统的研究，首先采用分步提取法提取油茶粕中的各 类蛋白质，对其中含量较高且抗氧化性均较强的清蛋白进行提取工艺优化，再 分离出清蛋白中的抗氧化功能力较强的蛋白，分子量为14000Da；探讨了油茶粕 分离蛋白的功能及理化性质；通过体外消化模型，研究了油茶粕分离蛋白在消 化过程中的抗氧化活性变化，发现有一组分抗氧化能力显著增强，可能对肠道 具有保护作用。本研究的主要内容与结果如下： 1．分步提取了茶粕中各类蛋白质并进行羟自由基(·OH)清除实验。结果表 明：茶粕中主要以清蛋白和谷蛋白为主，分别占茶粕总蛋白含量的45．86％和 40．33％，且在同一浓度下，清蛋白的自由基清除能力最大，在样品浓度为2mg／mL 时其清除率为38．56％，8mg／mL时清除率为92．13％，呈现出浓度依赖性关系。 而茶粕蛋白中醇溶性蛋白和球蛋白含量较少，分别占总蛋白含量的4．25％和 5．62％。茶粕球蛋白羟自由基(·OH)清除能力极弱。因此选择含量较高且功能 性较强的清蛋白做进一步研究。 2．针对茶粕中含量较高且羟自由基清除率较强的清蛋白采用响应面法 (RSM)优化其提取工艺。结果显示，茶粕清蛋白的最优工艺参数为：温度为 47℃，料液比为1：15，时间为50min，清蛋白提取率为77．98％。 G．50对 3．采用阴离子交换柱DEAE．SephadexA．25和凝胶层析柱Sephadex 茶粕清蛋白进行分离，获得具较高自由基清除率的功能性组分。结果表明：经 G．50对茶粕清蛋白B组分进行分离，得到抗氧化活性较 59．02％，再经Sephadex 高的B．2蛋白组分，其羟自由基(·OH)清除率达70．82％。B．2组分经凝胶电泳， 测得其分子量约为14000Da。 4．研究了茶粕分离蛋白(TPI)的功能及理化性质。与大豆分离蛋白(SPI) 相比，TPI水溶解性较好，溶解度达到72．57％，乳化性和乳化稳定性也较SPI II 摘要 蛋白的变性温度为88．33℃。 5．探讨了茶粕分离蛋白(TPI)对肠道的保护作用，并对其功能性组分进行 分离。模拟胃肠液消化后，TPI最终消化率达到80．01％。再将模拟胃肠液消化 至0．53％，肽类物质含量从86．65％增加到92．79％，且抗氧化活性显著增强，羟 G．25对经大孔树脂DA201．C处理后 提高至55．43％。采用凝胶层析柱Sephadex 的肽类物质进行分离，洗脱后得到四个峰，其中峰3抗氧化活性最高，对·OH 和·02’的清除率分别为86．36％和60．23％。 关键词：油茶粕；蛋白质；分离；体外消化；抗氧化 III ABSTRACT ABSTRACT Chinaisa inthefieldofCamelliaAbel oil largecountry oleiferaproduction．The seedcakeisa ofoil ofC Abel．C Abelis refineryoleifera oleifera usually byproduct islow．I