牛初乳免疫球蛋G的规模化提取关键技术及活性保持技术的研究.pdfVIP

摘要 以牛初乳为原料，主要研究了牛初乳 IgG 低温乙醇预提取、三聚磷酸钠预提 取、超滤浓缩提取、杀菌的工艺方法和热变性保护剂、胃酸保护剂的配方，确定 了牛初乳 IgG 的规模化提取和保护工艺，对牛初乳资源的利用和初乳功能性食品 的开发具有重要意义。 1 预提取工艺 以低温乙醇为提取剂，选取乙醇浓度、pH 值、离子强度进行单因素及正交 试验，检测 IgG 的纯度和回收率，确定最佳提取工艺条件为：乙醇浓度为 20%、 pH 值为 6.7、离子强度为 0.06mol/kg。纯度和回收率分别为 39.28%、79.32%。 以三聚磷酸钠为提取剂，选取三聚磷酸钠添加量、pH 值、提取温度进行单 因素及正交试验，检测 IgG 的纯度和回收率，确定最佳提取工艺条件为：三聚磷 酸钠添加量为 0.5%、pH值为 4.0、提取温度为 45℃。纯度和回收率分别为 33.74%、 82.31%。 2 超滤浓缩工艺 采用中空纤维超滤装置和三种中空纤维膜组件，检测 IgG 的纯度和回收率、 超滤膜组件通量，确定适合的膜组件；选取料液稀释度、超滤压力、超滤温度进 行正交试验，检测 IgG 的纯度和回收率，确定最佳工艺条件为：料液稀释倍数为 2倍、超滤温度为 30℃、超滤压力为 0.10Mpa。纯度和回收率分别可达 53.03%、 82.23%。 3 杀菌工艺 经过 65℃ 30min的巴氏杀菌和 75℃ 15s的高温短时杀菌，IgG 活性保留率 分别为 90.68%、86.23%，产品品质较为接近，但高温短时杀菌法能有效的提高 生产效率。 4 复合热变性保护剂配方 以三种保护剂的添加量设计复合热变性保护剂配方的二次通用旋转试验，检 测 95℃水浴后的 IgG 活性保留率，确定最佳配方为：谷氨酸添加量为 0.22%、 麦芽糖添加量为 7%，甘油添加量为 12.5%。IgG 活性保留率为 90.91%。 5 人工体外消化试验 采用超声法结合薄膜分散法，以包埋率为指标，选取大豆磷脂-胆固醇质量 比、超声提取温度、超声提取时间进行正交试验，最佳工艺条件为：大豆磷脂和 胆固醇的质量比为 2:1、超声提取温度为 30℃、超声提取时间为 15min。此条件 下包埋率为 44.16%。 I 脂质体化后的牛初乳 IgG冻干粉分别于 pH为 2.0的人工成人胃液、pH为 4.0 的人工婴儿胃液、pH 为 6.8 的人工小肠液中进行人工消化试验，IgG 活性保留率 42.04% 77.23% 75.02% 分别为 、 、 。与对照组相比，人工成人胃液环境中的活性 保留率提高明显，而人工婴儿胃液和人工小肠液环境中无需添加保护剂。 关键词：免疫球蛋白 G 低温乙醇提取 三聚磷酸钠提取 超滤浓缩 热变性保护剂 人工体外消化试验 II Abstract Pre-extraction by cold ethanol and trimeric sodium phosphate,concentration by ultrafiltration,sterilization,as well as protective agent of thermal denaturation and gastric acid of bovine immunoglobulin were mainly researched by using bovine colostrum as raw material.The Establishment of the key technology of large-scale production and protection process was of great significance for exploiting bovine colostrum anddevelopingthe functional colostrum food. 1.Pre-extraction When the extracting agent was cold ethanol,the process paramete