非结核分枝杆菌快速检测方法的研究进展.pdf

第 39卷 第 2期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vo1．39．NO．2 2017 年 2 月 ChineseJournalofPreventiveVeterinaryM edicine Feb． 2017 doi：10．3969~．issn．1008—0425．2017．02．19 非结核分枝杆菌快速检测方法的研究进展 师清博 ，赵明明，单晓枫 ，王春凤 ，钱爱东 (吉林农业大学动物科学技术学院，吉林 长春 130118) 中图分类号 ：$852．61 文献标识码 ：B 文章编号 ：1008—0589(2017)02—0163．04 非结核分枝杆菌 (NonmberculousMycobacterium，NTM) 1 分子生物学技术 是指人 、牛结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的一大类分 枝杆菌的总称 。NTM是机会性致病菌 ，并且大部分的 自Hance等于 1989年首先将PCR技术应用于结核分 NTM是腐物寄生菌 ，广泛存在于 自然环境中，如土壤 、 枝杆菌(MTB)的检测后[6]，PCR方法及其与其它方法相结 水、灰尘等 ，NTM主要从环境 中的水、土壤和微生物气 合的各种复合PCR技术已经陆续用于对分枝杆菌的分离 溶胶中感染人和动物 ，目前 NTM 在动物与人 以及人与人 鉴定与实验室检测。PCR可以简便 、快速地鉴定分枝杆 之间的传播尚无报道_l_。迄今为止已发现 150多种NTM[”， 菌，其检测的敏感性为 1cfu~20cfu的分枝杆菌_7_。 其中约 1／3与人类疾病有关 。近年来 ，NTM 的感染率有 1．1 PCR一直接测序法 PCR一直接测序法 ，即对特定的 所上升 ，而且继发于获得性免疫缺陷综合征 即艾滋病 核苷酸靶序列直接测序并分析，是菌种鉴定可靠而准确的 (AIDS)患者的情况比较多见 ，已引起各国卫生部 门的高度 方法 ，甚至可以鉴定至其亚种的水平。常用于鉴定NTM 重视_3]。世界卫生组织公布的报告指出，世界上约 3530 的靶基 因有 hsp65、rpoB以及 16S一23SrRNA基 因内转录 万人为 HIV 阳性患者 ，这些人群成为 NTM 的易感人群 ， 间隔区序列等吲，其中 16SrRNA可以用于对大多数的细 并且 易于继发其它并发症 的风 险较高_4_。NTM 所 引起 的 菌进行鉴定，而且也可以用于NTM菌群的鉴定，尤其是 感染可以大致分为以下几类 ：皮肤和软组织感染、单独的 快速生长 的菌群 ，如偶发性的分枝杆菌及龟分枝杆菌 。 肺部感染 以及继发于感染性 的疾病 。已有研究显示 ， Kim等以hsp65、rpoB和 16SrRNA为靶基因，采用直接 NTM 可以同时造成免疫功能正常 以及免疫缺陷者的感 测序法检测分离 自韩 国本土牛场 的 43株 NTM，经 染[5]，此外 ，非结核分枝杆菌病与结核病在临床表现上非 BLAST分析后准确地鉴定出其 中有 31株为禽分枝杆菌复 常相似 ，不易于鉴别诊断，并且致病菌种类多、耐药率 合体 (MAC)，又在 MAC中鉴定 出23株为胞 内分枝杆菌 高，对结核以及副结核菌素变态反应能够产生假阳性或阳 (M．inracelluare)，8株为鸟分枝杆菌(M．av／um)，另外 12株 性反应 ，因而对动物检验 、检疫工作造成了一定的影响。 为其它非结核分枝杆菌，特异性为99％～100％。他们还 由于其临床表现与结核非常相似，以至于常造成误诊或因 发现 ，603bp的hsp65基因更适合用于 M．inracelluare的 诊断不及时而贻误治疗的最佳时机 ，为此快速 、准确地鉴 分离鉴定 ，而 711bp的rpoB基因则更适用于鉴定 M．avi． 别NTM 的感染则显得非常重要。然而 ，传统的病原学检 um及其亚种 io]。 查方法耗时较长 ，而且特异性、灵敏度较