荆半夏叶片外植体快繁技术研究.pdfVIP

第22卷第12期 荆f1职业技术学院学报 2007年 12月 Vo1．22 No．12 Journal of Jingmen Technical College Dec．20o7 荆半夏叶片外植体快繁技术研究 王学民 (荆楚理工学院生物工程学院，湖北荆门 448000) [摘 要] 以荆门地区芍药叶形半夏的叶片为外植体，分别取不同时间叶片接入不同培养基诱导形成珠芽，然后 将珠芽接入不同成苗培养基并在不同培养条件下培养，使其在形成小苗过程中形成小块茎。结果表明：形成珠芽前的叶 片在培养基MS+0．5 mg／LIAA+0．8 mg／L 6一BA上诱导形成殊芽的效果较好；殊芽分开后接入培养基MS+0．05 mg／ L BA+0．01NAA mg／L中采用每天10 h光照培养可以获得适合于大田栽种的小块茎。 [关键词] 半夏；叶片；快繁；块茎 [中图分类号] $567．23 9 [文献标识码] A [文章编号] 1008—4657(2007)12—0001—04 半夏(pinellia ternate breit)是天南星科半夏属多年生草本植物，以块茎人药，具镇咳祛痰、和胃止 呕、祛风定惊、消肿散节等多种功效，是一种常用的传统中药材。生长于湖北荆门地区的半夏(荆半夏) 是药材质量较好的品系之一，野生资源较丰富，但是，近年来过度采挖野生半夏也使野生半夏资源濒临 枯竭。本研究希望通过组培的方法大量获得适合于生产的的小块茎，为半夏的人工栽培奠定基础。 半夏可通过块茎、珠芽及种子繁殖。半夏种子较小，萌发率也不高，一般不适合做生产上的繁殖 体 。珠芽埋人土中能形成小苗，在这一过程中也就形成了块茎，珠芽通过一年的生长形成的块茎较 小，一般直径在0．8～1．0 cm左右，如作为药材出售很不经济。一年生的块茎萌发成苗后，叶柄上能产 生珠芽，同时块茎也在增大，但2～3年生块茎过大，其萌发率不如一年生小块茎，其单位面积的净增量 也不如小块茎 。所以，作为人工栽培采用的繁殖体最好是一年生、大小0．8—1．1 cm之间的小块茎。 关于半夏快繁的研究报道较多，有报道用半夏叶柄或叶片为外植体直接诱导块茎成功[3，4】，直接形成小 块茎可避免经历愈伤阶段从而避免产生突变，但笔者认为，从外植体到块茎的过程必然经历脱分化和再 分化的过程，只是该方法的愈伤阶段不足够明显。避免组培中的遗传变异主要在于减少引起变异的因 素，如愈伤阶段持续的时间、高浓度激素的使用等。另外，该报道对诱导出块茎的大小和萌芽率未作讨 论，是否适合做种茎也未可知，本研究紧密结合半夏的栽培实践，参照半夏的自然繁殖过程，希望通过较 简单的培养程序短时间内大量获得直接用于生产的繁殖体。 1 材料与方法 1．1 培养程序 选用荆门地区芍药叶形半夏为材料。实验分为珠芽的诱导和小块茎的形成两个环节。珠芽的诱 导：于4月5日种下小块茎，分别在5月1日、5月25日、8月15日及9月5日取叶片接人培养基。将诱 导出的珠芽进行增殖培养后接人成苗培养基，将形成的小苗移栽，等小苗自然死亡后给予适当的温度和 水分，统计小块茎的萌发率。 1．2 培养基 珠芽诱导培养基：基本培养基为Ms，其中分别添加以下不同种类和不同浓度的激素：0．5 mg／L IAA 或NAA+6一BA(0．5，0．8，1．2)mg／L。块茎形成培养基：Ms0；Ms+0．05 mg／L BA+0．01NAA mg／L； [收稿日期]2007—09—23 [作者简介]王学民(1964一)，男，河北唐山人，荆楚理工学院教授。研究方向：医学遗传学。E—mail：wxm641213@ tom．com。 1 MS+O．5 mg／L BA+O．2 mg／L NAA。以上培养基其它条件均为：pH值5．8，琼脂7．0 g／L，蔗糖3％，块 茎形成培养基蔗糖浓度为1％。 1．3 接种方法和培养条件 叶片在超净工作台内按如下步骤消毒：75％酒精浸泡3O s_+无菌水清洗1次—+0．1％升汞浸泡1O min_+无菌水冲洗5次。在无菌的滤纸上晾干后，切成1