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毛稃偃麦草染色体核型研究

毛稃偃麦草染色体核型研究   摘要: 采用根尖压片法对毛稃偃麦草的细胞染色体进行核型分析。结果表明毛稃偃麦草(Elytrigia alatavica)染色体数目为2n=42,染色体相对长度组成为12L+4M2+14M1+12S,核型公式K(2n)=6X=42= 36 m+6 sm(2sat),属于“1B”类型。其中,3对为近中着丝粒染色体,且带有1对随体,其余均为中着丝粒染色体。其结果可以为毛稃偃麦草的细胞学特性和遗传机制的研究提供理论依据。 关键词: 毛稃偃麦草;染色体;核型 中图分类号: Q 813.4文献标识码: A文章编号: 1009-5500(2011)05-0034-04 偃麦草属(Elytrigia)是禾本科小麦族(Triticeae Dumort)中的一个属,在世界范围内约有50种,分布在温带和寒带地区[1]。该属植物叶片条形,下面光滑,上面粗糙或疏生柔毛,具横走的根状茎或短根茎,穗状花序直立,小穗有3至数小花,无柄,单生于穗轴的各节,无芒或具短芒,稍可具长芒,外稃长于内稃或与内稃等长[2]。该属植物具有耐干旱、耐寒冷、耐盐碱、侵占能力极强等优良特性,蕴含抗病(高抗黄矮病、三锈和白粉免疫)、抗寒、抗旱、耐盐碱、大穗多花等基因,是小麦育种的重要野生亲本[3-5]。毛稃偃麦草(Elytrigia alatavica)原产于新疆,是属于干旱地区的多年生草本,是牛羊晚秋很好的放牧场地。染色体对物种的变异、遗传、类变和进化、形态发生、增殖以及生活力过程平衡的控制,都具有极其重要的作用。目前尚未有毛稃偃麦染色体数目及核型分析的相关报道。研究针对毛稃偃麦草的细胞染色体数目、倍性等核型结构进行分析,为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。 1 材料和方法 1.1 试验材料 由美国国家种质资源库提供毛稃偃麦草(原产于新疆)的种子。 1.2 试验方法 选取饱满的种子置于25 ℃的恒温箱中培养。待种子根长至1 cm,早上8:00~10:00,切下长0.5 cm的根尖,经8-羟基喹啉(0.002 mol/L)处理2~4 h。再用卡诺固定液(无水酒精∶冰醋酸=3∶1)固定2~4 h。1.0 mol/L盐酸60 ℃水浴条件下解离7 min。将根尖放在载玻片上,切下顶端1~2 mm,滴加石炭酸品红染液进行染色,10 min即可压片。 在光学显微镜下观察并挑选染色体中期分裂相中染色体数目完整、分散良好、着丝点清晰、无重叠、各条染色体处于同一平面,并且着色鲜明、形态清晰、着丝粒明显、随体明显可见的细胞(若染色体带有随体),进行显微照相。用LY-WN万能视频成像装置(成都励扬精密机电有限公司)读取视频显微图像,KARIO自动核型分析软件进行染色体配对。用Scope Photo显微尺量出每条染色体的长臂值、短臂值,制成染色体参数表格。并根据染色体全长顺序编号排序,若2对染色体长度完全相等,则按短臂长度顺序排列,长者在前短者在后[6]。以染色体长臂、短臂的相对长度绘制核型模式图。 以染色体臂比来确定着丝点位置[7]。核型不对称系数按Arano[8]提出的长臂总长与全组染色体总长之比的核型不对称系数(AS.K%)来确定。核型分类按Stebbins[9]提出的最长染色体与最短染色体之比及臂比大于2的染色体所占的比例标准进行,即“1A”为最对称,“4C”最不对称。核型越对称,在进化关系上越处于原始的地位。 臂比=长臂/短臂 相对长度(%)=单个染色体长度/单套染色体组全长× 100% 核型不对称系数=长臂总长/全组染色体总长×100% 染色体长度比=最长染色体的长度/最短染色体的长度 着丝粒指数=短臂/该染色体长度×100% 2 结果与分析 毛稃偃麦草种质的染色体数目2n=6X=42(图1)。染色体平均长度6.48 μm,为中染色体。染色体绝对长度变化范围为3.15~10.84 μm,相对长度变化范围为2.31~7.96 μm,染色体臂比变化范围为1.16~1.93 μm。染色体长度比为3.44,臂比值2.0的染色体所占比例为0,核型不对称系数为57.58%,属1B核型,较为原始。21对染色体中,3对为近中着丝粒染色体,其中,1对带有随体,其余均为中着丝粒染色体。染色体相对长度组成为12L+4M2+14M1+12S。 核型公式为K(2n)=6X=42= 36m+6sm(2sat)(表1)。 3 讨论与结论 在作染色体核型分析时,以体细胞染色体数目为准。统计的细胞数目应在30个以上。其中,85%以上的细胞具恒定一致的染色体数,即可认为是该植物的染色体数目[10]。宋芸等[10]报道常规染色体核型分析是以染色体形态为依据,不同研究

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