HPLC 法测定米力农及注射用米力农的有关物质.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC 法测定米力农及注射用米力农的有关物质 王爱华1 吴雨川1 杜霞2 白政忠1（1. 黑龙江省食品药品检验检测所 黑龙江哈尔滨 150088；2. 哈尔滨理工大学 黑龙江哈尔滨 150080） 　　【摘要】目的 建立HPLC 法测定米力农及注射用米力农中的有关物质。方法 采用Diamonsil C8（250mmtimes;4.6mm，5mu;m）色谱柱，以磷酸氢二钾溶液（取磷酸氢二钾2.7g，加水800ml 溶解后，加三乙胺2.4ml，用磷酸调pH 值至7.5）—乙腈（80：20）为流动相；检测波长为220nm。结果 在选定的色谱条件下，主峰与其他各杂质峰均能良好的分离。结论：本方法专属性强，灵敏度高，可用于测定米力农及注射用米力农中的有关物质，为质量标准的修订提供了依据。 　　【关键词】米力农；有关物质；高效液相色谱法【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-9753（2016）4-0277-01 　　米力农为磷酸二酯酶抑制剂，为氨力农的同类药物，作用机理与氨力农相同。口服和静注均有效，兼有正性肌力作用和血管扩张作用。但其作用较氨力农强10 ～ 30 倍，耐受性较好[1]。 　　文采用高效液相色谱法测定了有关物质，可有效检测产品中的杂质量，为产品的质量控制和标准的提升提供了参考和依据。 　　1 仪器与试药1.1 仪器 Aglient 1100 高效液相色谱仪（Aglient 公司）；酸度计（梅特勒公司）；电子天平（梅特勒公司）。 　　1.2 试药 米力农（批号120103，110501）和注射用米力农（批号072111001，规格为5mg）分别由国内某二个药业有限公司提供。 　　米力农对照品（中国药品生物制品检定所，批号101065-201001；含量99.0%）；米力农杂质A 对照品（中国药品生物制品检定所，批号101066-201001）磷酸二氢钾（分析纯，国药集团化学制剂有限公司）；乙腈（色谱纯，美国TEDIA 公司）；三乙胺（色谱纯，赛默飞世尔科技有限公司）；磷酸（色谱纯，FLUKA 公司）2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Diamonsil C8 色谱柱（250mmtimes;4.6mm，5mu;m），柱温30℃；以磷酸氢二钾溶液（取磷酸氢二钾2.7g，加水800ml 溶解后，加三乙胺2.4ml，用磷酸调pH 值至7.5）—乙腈（80：20）为流动相。 　　流速为1.0mLmiddot;min-1，检测波长220nm。进样量20mu;L。 　　2.2 样品溶液的配制2.2.1 供试品溶液的配制分别精密取原料和注射剂适量，加流动相溶解并稀释制成2mgmiddot;mL-1 的米力农溶液（必要时，在80℃水浴中加热使溶解），作为供试品溶液。 　　2.2.2 自身对照溶液的配制精密量取1ml，置100ml 量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液1ml，置10ml 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为自身对照溶液。 　　2.2.3 米力农杂质A 对照溶液的配制精密取米力农杂质A[1,6- 二氢-2- 甲基-6- 氧代-（3，4-二吡啶）-5- 酰胺] 对照品适量，精密称定，用流动相溶解并制成2?gmiddot;mL-1 的溶液，作为米力农杂质A 对照溶液。 　　2.2.4 系统适用性溶液米力农对照品与米力农杂质A 对照品适量，用流动相溶解并稀释制成各含20?gmiddot;mL-1 的溶液，作为系统适用性试验溶液。 　　2.3 系统适用性溶液考察在这个液相色谱条件下，米力农杂质A 与米力农的相对保留时间约为0.6，要求米力农杂质A 峰与米力农峰的分离度应大于4.0，连续进样5 次，米力农峰面积的RSD 应不小于5.0%；取有关物质项下的系统适用性溶液，连续进样5 次，分离度为11.66（见图1），连续进样5 次，米力农峰面积的RSD 为0.5%。 　　2.4 专属性考察取米力农原料约50mg，平行5 份，分置25mL 量瓶中，分别加入6molmiddot;L-1 盐酸溶液3mL、6molmiddot;L-1 氢氧化钠溶液3mL、30%过氧化氢溶液5mL，于140℃烘箱中放置6 小时；光照破坏为在4500Lx 条件下放置48 小时，在上述酸、碱破坏的样品溶液分别加入等量碱、酸溶液中和，用流动相稀释至刻度，照“2.1”项下色谱条件，各进样20mu;L，记录色谱图。 　　结果表明：试验结果表明，酸破环、碱破坏、氧化破坏、高温破坏及光照破坏，均能破坏出米力农杂质A，空白溶剂无干扰，米力农主峰与各分解产物峰分离良好，说明本法适用于米利农及其有关物质的分离测定。 　　2.5 米力农杂质A 线性关系精密称取米力农杂质A 10.06 mg，置于100 ml 量瓶中，加流动