复旦大学《生物制药技术》教学-微生物的营养-2014-3.pptVIP

培养基 一、选用和设计培养的原则和方法 定义：广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长 繁殖 所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生 物培养提供除营养外的其它所必须的条件。 满足菌体的生长 促进产物的形成 特点： 任何培养基都应具备微生物所需要的营养要素，且应比例适当。且一旦配成必须立即灭菌。 用途： 促使微生物生长； 积累代谢产物； 分离微生物菌种； 鉴定微生物种类； 菌种保藏； 制备微生物制品。 （一）培养基组分应适合微生物的营养特点（目的明确） （二）营养物的浓度与比例应恰当（营养协调） （三）物理化学条件适宜（条件适宜） （四）根据培养目的选择原料及其来源（经济节约） 在微生物学研究和生长实践中，配置合适的培养基是一项最基本的要求。*** 一）培养基组分应适合微生物的营养特点 即根据不同微生物的营养需要配制不同培养基。 不同营养类型的微生物，其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物质组成。异养型生物的培养基至少需要含有一种有机物质，但有机物的种类需适应所培养菌的特点。 按微生物的主要类群来说，它们所需要的培养基成分也不同： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基 LB (Luria-Bertani) 放线菌： 高氏一号培养基 真菌： 查氏合成培养基 PDA (Potato-Dextrose-Agar) 酵母菌： 麦芽汁 Ginsenoside compound K (μM) Mol conversion quotient (%) Carbon source Glucose 15.44 ± 0.86 21.19 Starch 14.67 ± 0.97 20.13 Lactose 13.44 ± 0.83 18.51 Sucrose 22.06 ± 0.65 30.26 Maltose 14.53 ± 0.53 19.93 Nitrogen source Corn steep powder 15.44 ± 0.86 21.19 Peptone 16.15 ± 0.45 22.16 Tryptone 15.71 ± 0.43 21.56 Beef extract 14.39 ± 0.85 19.73 Soybean power 20.98 ± 0.91 28.78 Ammonium acetate 11.16 ± 0.57 15.31 Ammonium nitrate 11.93 ± 0.36 16.37 （二）营养物的浓度与比例应恰当 ●浓度过高——微生物的生长起抑制作用， 浓度过小——不能满足微生物生长的需要。 ●碳氮比（C/N）直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累，故常作为考察培养基组成时的一个重要指标；C/N：100：0.5-2 ** 碳源中碳原子的mol数 氮源中所含的氮原子的mol数 C/N比值= 速效性氮（或碳）源与迟效性氮（或碳）源的比例 各种金属离子间的比例 （三）物理化学条件适宜 pH: 各类微生物的最适生长pH值各不相同： 细 菌：7.0~8.0 放线菌：7.5~8.5 酵母菌：3.8~6.0 霉 菌：4.0~5.8 在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，培养基的初始pH值会发生改变，为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方式： 内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。 外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液 （四）根据培养基的应用目的选择原料及其来源 用于培养菌体种子的培养基营养应丰富，氮源含量宜高（碳氮比低）； 用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低，（但若发酵产物是含氮化合物时，有时还应提高培养基的氮源含量）；若代谢产物是次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素或特定的代谢产物； 当所设计的是大规模发酵用的培养基时，应重视培养基中各成份的来源和价格，应选择来源广泛、价格低廉的原料，提倡以粗代精，以废代好。 二、培养基的种类 1