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是诊断铁粒幼红细胞贫血的重要依据，能发现数量不等的环状铁粒幼红细胞，并且多见粗颗粒的3型和4型铁粒幼红细胞。 注意事项 玻片必须经无铁处理：将新玻片经清洁液浸泡24小时，取出后反复水洗浸入95％酒精24小时，晾干，再浸泡在5％盐酸中24小时，用D2H2O反复洗玻片，取出烤干后备用。 酸性亚铁氰化钾液必须新鲜配制。 最好用骨髓小粒丰富的骨髓涂片进行染色并作细胞外铁观察。 非特异性酯酶染色 原理 非特异性酯酶是作用于短链脂肪的酶，当酯酶活性存在时，水解基质中的α－醋酸萘酚，与重氮盐偶联，生成不溶性的有机产物，定位于胞浆上。 试剂 甲醛： 基质液： 1/15M的磷酸缓冲液 PH7.4 40ml 10g/L α－醋酸萘酚50％丙酮液 0.8ml 重氮盐（Diazo blue B） 40mg 方法 新鲜涂片用甲醛蒸汽固定5分钟。 流水冲洗5分钟，晾干。 置于基质液中37℃1小时，水洗泡10分钟。 20g/L甲绿复染20－30分钟。 水洗，晾干，镜检。 临床意义 单核细胞系统呈阳性，伴随着细胞的成熟而加强，对AL有鉴别诊断作用。 非特异性酯酶-氟化钠抑制试验 同非特异性酯酶，只是在1ml作用液中，加入1.5mg 氟化钠，即可抑制单核细胞的酯酶，故可作急性单核细胞白血病的鉴别诊断。 急性白血病中的组化染色 白血病 POX NSE PAS ALL — + + AML M0 + — — M1 + (3原始细胞) — — M2 ++ — — M3 +++ + — M4 + +（原单细胞） — M5 —/+ ++ —/+ M6 +（原粒细胞） — +（幼红细胞） M7 — + + 中性粒细胞碱性磷酸酶染色（AKP） 目的 鉴别白血病（低）和白血病样（高）反应 鉴别淋巴肉瘤（高）和何杰金病 鉴别细菌性感染（高）与病毒性感染 分布 血细胞的碱性磷酸酶活性，主要见于成熟的中性粒细胞，定位于胞浆中。 原理 细胞中的AKP在PH9.5－9.6缓冲液中能使基质中的磷酸萘酚钠水解，释放出萘酚。后者与一种稳定的重氮盐（常用有固紫Fast--Garnet，GBC或固蓝RR）偶联，生成不溶性的偶氮染料，沉积于细胞上。 试剂 95%乙醇 固酱紫GBC AS-BI磷酸萘酚12.5mg + DH2O100ml 0.2M tris缓冲液：三羟甲基氨基甲烷2.43g+DH2O溶至100ml。 0.05M tris 缓冲液（PH8.6-9.0）：0.2 M tris 缓冲液25ml+ 0.1M HCL 49ml 贮存液：50ml AS-BI磷酸萘酚+PH8.8 0.05Mtris缓冲液50ml混匀，冰箱保存 1%甲基绿 染色步骤 ? 新鲜BM片及血片待干 95%乙醇固定10分钟 固酱紫1mg + 2ml贮存液混匀，立即滴加数滴在血片或BM片上，置37℃孵箱孵育30分钟 用蒸馏水快冲 放入1%甲绿中复染5分钟 用蒸馏水快冲，待干，镜检 结果判断 阳性颗粒呈红色，定位于成熟中性粒细胞胞浆 内。 ? 计数方法，按碱酶活性强弱，分为0-4+共5级。 分数 特点 0 胞浆内无红色的颗粒 1 弥散的红色，偶见颗粒 2 弥散的红色，有中等量的颗粒 3 显著的红色，有较多的颗粒 4