薄皮甜瓜白啄瓜枯萎病抗性基因Fom-2同源克隆与表达分析.docVIP

薄皮甜瓜白啄瓜枯萎病抗性基因Fom-2的同源克隆与表达分析 　　摘 要： 枯萎病是甜瓜等瓜类作物的毁灭性病害，Fom-2基因介导了甜瓜抗枯萎病生理小种0和1，抗枯萎病育种是甜瓜等瓜类作物育种的重要目标之一。通过同源克隆方法从薄皮甜瓜白啄瓜中克隆到了枯萎病抗性基因Fom-2，推定编码1 099个氨基酸，所推定的蛋白质序列经Blast分析与数据库中NBS-LRR类R基因具有较高的同源性。进一步序列分析FOM-2蛋白具有典型的R基因的NB-ARC及SCOP 2个结构功能域。实时荧光定量PCR结果表明，白啄瓜Fom-2基因经枯萎病接种后表达明显上调。白啄瓜Fom-2基因为白啄瓜抗病育种奠定了基础。 　　关键词： 薄皮甜瓜； 白啄瓜； 枯萎病； Fom-2基因 　　中图分类号：Ｓ６52 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９－９９８０?穴２０11?雪０6－1059－０4 　　 　　Cloning and transcriptional analysis of resistance gene Fom-2 from Cucumis melo ssp. Agrestis Jeffrey 　　YANG Jia-fu1， ZHAO Xuan2， LIU Ju2， YANG Xiao-dong2， WANG Shi-wei2， YANG Jing-hua2， ZHANG Ming-fang2 　　（1Vocational College of Science and Technology of Wenzhou， Wenzhou， Zhejiang 325006 China； 2Department of Horticulture， Zhejiang University， Hangzhou， Zhejiang 310029 China） 　　Abstract: Fusarium wilt （Fusarium oxysporum f. sp. melonis Snyder and Hansen） is one of destructive disease in melon crop production. Fom-2 gene was genetically identified to control the resistance of races 0 and 1. Resistance to fusarium wilt breeding is one of important targets for melon breeding. In this study， we cloned the Fom-2 gene from Baizhuogua melon （Cucumis melo ssp. agrestis Jeffrey） by using homological cloning method， which was deduced to encode 1099 amino acids and exhibited high similarity to NBS-LRR type of R genes in plant. The deduced FOM-2 protein contained NB-ARC and SCOP typical motifs of R gene. The expression of Fom-2 gene was highly induced after inoculation with fom race 1. In conclusion， the cloning of Fom-2 gene is good for breeding with resistance to fusarium wilt . 　　Key words: Cucumis melo； Baizhuogua； Fusarium wilt； Fom-2 gene 　　白啄瓜（Cucumis melo ssp. agrestis Jeffrey）属于薄皮甜瓜类型，是温州地区的特产瓜类作物，在温州地区具有很大的栽培面积，栽培面积常年稳定在600~700 hm2。同时，温州地区还具有接近我国人口最密集的长江三角洲蔬菜瓜果消费市场的区位优势，当天采摘，当天即可送到市场，运输费用低，白啄瓜等薄皮甜瓜生产具有非常强的市场竞争能力。近年来，随着集约化、规模化的栽培，白啄瓜病虫害扩散蔓延十分迅速，对甜瓜产量和品质造成极大的影响，尤其是枯萎病的影响。侵染甜瓜的枯萎病病原菌属于甜瓜专化型尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f. sp. melonis Snyder and Hansen）。Risser等[1]认为，可将尖孢镰刀菌甜瓜专化型的病原菌划