预苯丙酸脱氢酶(pdh)基因对青花菜遗传转化的分析-analysis of genetic transformation of broccoli by prephenate dehydrogenase ( pdh ) gene.docxVIP

福建农林大 福建农林大学硕士论文 预苯丙酸 预苯丙酸脱氢酶（PDH）基因对青花菜遗传转化的研究 目录 HYPERLINK \l _bookmark0 摘要 I HYPERLINK \l _bookmark1 关键词 I HYPERLINK \l _bookmark2 Abstract II HYPERLINK \l _bookmark3 Key words II HYPERLINK \l _bookmark4 前言 1 HYPERLINK \l _bookmark5 1 文献综述 1 HYPERLINK \l _bookmark6 1.1 维生素 E 1 HYPERLINK \l _bookmark7 1.1.1 维生素 E 的结构特征 1 HYPERLINK \l _bookmark8 1.1.2 维生素的 E 自然分布 2 HYPERLINK \l _bookmark9 1.1.3 维生素 E 的发现 2 HYPERLINK \l _bookmark10 1.1.4 维生素 E 的莽草酸合成途径 2 HYPERLINK \l _bookmark11 1.1.5 维生素 E 的生理功能 3 HYPERLINK \l _bookmark12 1.1.6 莽草酸途径维生素 E 合成的关键酶——预苯丙酸脱氢酶 4 HYPERLINK \l _bookmark13 1.2 抗除草剂新型靶位点——HPPD 5 HYPERLINK \l _bookmark14 2 目的和意义 6 HYPERLINK \l _bookmark15 3 技术路线 7 HYPERLINK \l _bookmark16 第一章 基因克隆 8 HYPERLINK \l _bookmark17 1 实验材料 8 HYPERLINK \l _bookmark18 1.1 植物材料 8 HYPERLINK \l _bookmark19 1.2 试剂 8 HYPERLINK \l _bookmark20 1.3 培养基 8 HYPERLINK \l _bookmark21 1.4 载体和菌种 8 HYPERLINK \l _bookmark22 1.5 试验器具和耗材 8 HYPERLINK \l _bookmark23 1.6 仪器与设备 9 HYPERLINK \l _bookmark24 2 试验方法 9 HYPERLINK \l _bookmark25 2.1 小拟南芥 DNA 的提取 9 HYPERLINK \l _bookmark26 2.2 酿酒酵母 INVSC1 总 RNA 的提取 10 HYPERLINK \l _bookmark27 2.3 cDNA 第一链的合成 11 HYPERLINK \l _bookmark28 2.4 酿酒酵母 PDH 基因和小拟南芥 HPPD 基因片段的 DNA 克隆 12 HYPERLINK \l _bookmark29 2.4.1 引物设计 12 HYPERLINK \l _bookmark30 2.4.2 DNA 的 PCR 扩增 12 HYPERLINK \l _bookmark31 2.5 目的基因片段的回收、连接、转化与检测 13 HYPERLINK \l _bookmark32 2.5.1 目的片断的回收13 HYPERLINK \l _bookmark33 2.5.2 大肠杆菌 TOP10 感受态细胞的制备 14 HYPERLINK \l _bookmark34 2.5.3 连接及转化 15 HYPERLINK \l _bookmark35 2.6 重组质粒的 PCR 菌液检测与测序 15 HYPERLINK \l _bookmark36 2.7 酿酒酵母 INVSC1 PDH 基因 cDNA 保守区的扩增 16 HYPERLINK \l _bookmark37 2.7.1 引物设计 16 HYPERLINK \l _bookmark38 2.7.2 PDH 基因保守区 cDNA 的 PCR 扩增 16 HYPERLINK \l _bookmark39 2.8 小拟南芥 HPPD 基因 cDNA 保守区的扩增 17 i HYPERLINK \l _bookmark40 2.8.1 引物设计 17 HYPERLINK \l _bookmark41 2.8.2 HPPD 基因保守区 cDNA 的 PCR 扩增 17 ii ii i iii HYPERLINK \l _bookmark42 3 结果与分析18 HYPERLINK \l _bookma