运动性低血色素大鼠骨骼肌自由基代谢变化研究.docVIP

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运动性低血色素大鼠骨骼肌自由基代谢变化研究

运动性低血色素大鼠骨骼肌自由基代谢变化研究   摘要: 运动性低血色素是影响运动能力的重要因素之一,但处于运动性低血色素状态时骨骼 肌自由基代谢变化规律目前研究较少,本实验通过11周递增负荷跑台运动建立大鼠运动性低 血色素模型,并对大鼠骨骼肌自由基代谢的变化进行研究,了解运动性低血色素大鼠骨骼肌 自由基代谢变化的规律。实验结果表明:1、递增负荷跑台训练导致运动性低血色素大鼠骨 骼肌中抗氧化酶活性明显降低,是造成自由基代谢紊乱的重要因素;2、运动性低血色素大 鼠Hb水平下降与骨骼肌SOD水平下降具有相关性。   关键词:运动性低血色素;骨骼肌;自由基   中图分类号:G804.7文献标识码:A文章编号 :1007-3612(2007)05-0636-03   肌肉组织是运动系统的最重要组成部分,肌细胞功能的正常与否与机体的运动能力密切相关 。由于骨骼肌在运动时可能会产生大量的自由基,从而造成骨骼肌的工作能力的下降,但是 在出现运动性低血色素时骨骼肌自由基代谢变化研究报道尚不多见,本研究通过运动性低血 色素大鼠模型的建立,来研究运动性低血色素大鼠骨骼肌组织自由基代谢变化规律,并对出 现了运动性低血色素大鼠骨骼肌自由基代谢与血红蛋白浓度的变化相关性进行分析以了解骨 骼肌自由基代谢对大鼠运动性低血色素的影响,为今后运动性低血色素的防治提供一些帮助 。      1研究对象与方法      1.1实验动物与运动方式   1.1.1实验动物 8周龄雄性Wistar大鼠20只,由中国医学科学院实验动物研究所提供。动物许可证编号:SCX K11-00-0006,动物级别:二级。将大鼠随机分为2组,C组(对照组,n=10);E组(运动 组,n=10)。动物饲料为全价营养颗粒饲料,由北京科澳协力饲料有限公司提供。京动许字 (2000)第15号,含铁量32.1 mg/100 g。动物饲养环境温度(23±2)℃,湿度40%~60%。大 鼠 分笼饲养,每个鼠笼5只。自由饮食,自然昼夜节律变化光照。实验动物分组情况见表1。表1实验动物分组? 组别N体重/gC (对照组)10200.19±8.68E(运动组)10201.2±10.08   1.1.2运动方式 E组大鼠在杭州段氏BCPT-96型跑台上进行11周递增负荷跑台训练。训练时采用跑台坡度???0 °,跑台速度为30 m/min,每周训练6 d,周日休息。前两周每天进行1次训练,第三周开始 为每天2次训练,早晚各1次。前五周的训练计划为:第1次训练时间为1 min,之后以2 min/ 次进行递增,最后1次的训练时间为97 min。第六周训练计划为:每天两次(两次的训练时间 相同),每次80 min。第七周训练计划为:每天两次(两次的训练时间相同),每次85 min。 第八周开始,以90 min/次为起点、2 min/d进行递增。如果训练过程中大鼠出现严重力竭 症状:后肢蹬地无力,腹部与跑道面接触,连续施加机械刺激大鼠不能继续跑动,则允许其 休息2~5 min。整个运动过程中,未使用电刺激。训练安排见表2。      1.2检测指标及方法   1.2.1取材方法   1.2.1.1血红蛋白、红细胞计数和红细胞比积在第五周训练结束24 h后对三组大鼠断尾取血20 μL,第十一周训练结束24 h后取血测定血红蛋白、红 细胞计数(RBC)和红细胞压积等指标。   1.2.1.2骨骼肌丙二醛、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶 在第十一周训练结束24 h后用戊巴比妥钠(2%)注射麻醉实验大鼠,迅速取出大鼠腓肠肌、 肝脏。取组织块(0.8 g左右)在4℃的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入 10 mL的小烧杯内。量取预冷的生理盐水,生理盐水的体积总量是组织块重量的9倍,用移液 器取总量2/3的生理盐水于烧杯中,用眼科小剪尽快剪碎组织块(盛有组织的小烧杯放入冰 水中)。将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3冷生理盐水冲洗残留在烧杯中的 碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中 ,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(15~20 min),充分研碎,使组织匀 浆化。将制备好的10%匀浆用普通离心机3 000 r/min左右离心15 min,离心好的匀浆留上清 弃下面沉淀。上清液用于各种指标的测定。   1.2.2测试方法   1.2.2.1红细胞相关指标的测试红细胞相关指标的测试采用日 本Sysmex F-820血细胞分析仪进行测定。? 1.2.2.2丙二醛的测试方法试剂盒由南京建成生物工程研究所 提供。严格按照试剂盒说明书操作。   1.2.2.3超氧化物歧化酶的测试方法试剂盒由南京建成生物工 程研究所提供。严

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