生物化学6核酸2PPT.ppt

;（二） DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;碱基互补配对 ; DNA;第三节 RNA的结构与功能;RNA一级结构分子组成：A、U、C、G;二级结构基本元件;RNA的种类、分布、功能;mRNA：是携带从DNA编码链得到的遗传信息，并以三联体密码子的方式指导蛋白质生物合成的RNA，由5 ’ 非翻译区、编码区和3’非翻译区组成。 ;;* mRNA结构特点;帽子结构;5′-cap：m7G(5′)pppNmp ;* mRNA结构特点;mRNA核内向胞质的转移 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 ;* mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，指导蛋白质的合成。;* tRNA的一级结构特点 分子量较小，一般由73～93个核苷酸组成 各种tRNA的3′一端为CCA；5′一端大多数为pG，少数为pC 含 10~20% 稀有碱基，如 DHU， ?等;N,N二甲基鸟嘌呤;* tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 TΨC环 额外环; 1980年牛心线粒体tRNAser只有63个核苷酸，沉降常数3S，缺少D环和D臂，呈二叶草型。;;tRNA functions as a amino acid transfer in protein biosynthesis. ;* rRNA的结构;原核生物;* rRNA的种类（根据沉降系数）;大肠杆菌16S，5S rRNA的二级结构;核糖体的组成;The crystal structure of a 23S ribosme ;四 、其他小分子RNA及RNA组学;snmRNAs的种类 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA ;RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。 ;核酸和蛋白质的比较;核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid;一、核酸分子具有强烈的紫外吸收效应;1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0;二、核酸的变性(denaturation);;例：变性引起紫外吸收值的改变;热变性; Tm：解链过程中，紫外光吸收值变化ΔA260达到最大变化值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。Tm与G+C含量成正相关。;三、DNA的复性与分子杂交 ;影响复性的因素 ;在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在复性时就可以形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。;DNA-DNA 杂交双链分子; ;单链DNA与 DNA杂交（DNA-DNA）—Southern blot;Southern Blotting;探针;第 五 节 核 酸 酶 Nuclease;核酸酶是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)： 专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 专一降解RNA。 依据切割部位不同 核酸外切酶：5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。;消化降解食物中的核酸以利吸收 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程 体外重组DNA技术中的重要工具酶 ; 核 酶;核酶的具体作用主要有： 　　1. 核苷酸转移作用 　　2. 水解反应，即磷酸二酯酶作用 　　3. 磷酸转移反应，类似磷酸转移酶作用 　　4. 脱磷酸作用，即酸性磷酸酶作用 　　5. RNA内切反应，即RNA限制性内切酶作用; 核酶发现的意义;小 结;DNA和RNA的比较;核酸的理化性质;小测验;3.关于HbS引起的镰刀状贫血症，下列说法正确的是： A