TACC3在膀胱尿路上皮癌中的表达及对T24细胞增殖和凋亡的影响-临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 保密 ??，在 年解密后适用本授权书。 不保密 ??。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医科大学硕士学位论文 天津医科大学硕士学位论文 目的： 中文摘要 明确转录相关酸性卷曲蛋白 3（TACC3）在膀胱尿路上皮癌中的表达，研究 TACC3 表达水平对膀胱癌 T24 细胞增殖和凋亡的影响。 方法： 采用 Western blot 方法检测 35 例膀胱尿路上皮癌组织和相应癌旁组织中 TACC3 蛋白表达，并结合临床病理资料进行相关性分析；通过体外细胞学实验 设计构建 shRNA 表达载体并通过 qPCR 筛选有效靶点，通过质粒转染干扰膀胱 癌 T24 细胞株的 TACC3 水平；采用 Western Blot 技术验证 RNA 干扰效果，MTT 法测定细胞生长抑制率，流式细胞法检测细胞凋亡率。 结果： .膀胱尿路上皮癌及癌旁正常黏膜组织组 TACC3 蛋白相对灰度值分别为： 0.62±0.10 和 0.29±0.14, 差异具有统计学意义（P＜0.05）；而在性别、年龄、 肿瘤大小及数量等方面差异无统计学意义（P＞0.05）；而在膀胱癌患者的病理分 期、肿瘤分级及吸烟与否等方面的差异具有统计学意义（P＜0.05）。 2. 成功构建 4 个 TACC3-shRNA 干扰质粒，并经 Hela 细胞筛选，得到 TACC3 干扰效果达到 90.5%的 pYr- LVX -TACC3-shRNA; 3. MTT 检测细胞生长抑制率显示 TACC3-shRNA 可抑制 T24 细胞的增殖达 62.24% (48h)；流式细胞术显示 TACC3-shRNA 可促进 T24 细胞凋亡，凋亡率达 39.57%（48h）。 结论： 1. TACC3 在膀胱尿路上皮癌组织中高表达，而在癌旁正常黏膜组织中低表 达。 .膀胱尿路上皮细胞癌组织中的 TACC3 表达水平与病理分期、肿瘤分级及 吸烟与否明显相关。 3. TACC3-shRNA 可抑制膀胱癌 T24 的细胞增殖并促进其凋亡。 4.TACC3 可能在膀胱尿路上皮癌的发生、发展中起重要作用, 有希望成为 研究膀胱癌重要靶标，并为膀胱癌的诊断和治疗提供新途径。 关键词：膀胱癌 TACC3 尿路上皮癌 增殖 凋亡 I Abstract Objective: To detect the expression of TACC3 protein in bladder urothelial carcinoma and study the influence of its expression level to proliferation and apoptosis in T24 cells. Methods: The expression of TACC3 protein in 35 cases of bladder urothelial carcinoma and 35 cases of normal mucous was detected by western blot and the clinical pathological features were analyzed; Through in vitro studies ， we design and construct several shRNA expression plasmid and screen the most effective target through qPCR. Then we use cytology transfection technique to interference TACC3 level in bladder cancer cells, western blotting to detect the interference effect of RNA,