尿脱落细胞FISH检查在膀胱癌诊断及复发监测中应用.docVIP

尿脱落细胞FISH检查在膀胱癌诊断及复发监测中应用 　　摘要：膀胱癌是泌尿系统常见肿瘤，尿液脱落细胞的FISH检查在膀胱癌诊断及复发检测的应用是目前研究的热点，本文就FISH技术在膀胱癌诊断及术后复发检测中的应用进行综述。 　　关键词：FISH检查；膀胱癌 　　膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，我国大约90%的膀胱癌为移行细胞癌。膀胱癌术后复发率较高，术后需长期随访。其诊断和术后随访方式一直是临床上研究的重要课题。目前我国主要以膀胱镜检查辅以尿脱落细胞检查作为膀胱癌诊断及复发监测的主要手段[1]。膀胱镜检查作为侵入性检查，会给患者带来痛苦，不易被接受，且对低恶性的膀胱癌患敏感度不高。尿脱落细胞形态学检查敏感度低，易受到血尿、尿路感染及膀胱灌注化疗等情况影响。美国食品药品管理局已经批准了部分尿液膀胱肿瘤标志物（如尿核基质蛋白和膀胱肿瘤抗原等）用于膀胱癌的诊断，但也存在特异性低和高昂的检查费用等问题[2]。寻找一种非侵入性的、特异性级敏感度高的新的膀胱癌诊断及复发监测方法成为了近年来的研究热点。 　　随着近年来肿瘤基因学的研究，荧光杂交技术（FISH）已广泛用于肿瘤的病因研究、治疗及诊断等多个方面，在膀胱癌领域也有极佳的表现。目前尿脱落细胞的FISH检查已用于膀胱癌的诊断。本文就尿脱落细胞的FISH检查在膀胱癌诊断及复发监测中的应用进行综述。 　　1 荧光杂交技术（（FISH）简介[3] 　　FISH是一门20世纪80年代初期在原有放射性原位杂交的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。与传统的放射性标记原位杂交相比具有安全、快速、灵敏度高、检测信号强、杂交特异性高、能同时显示多种颜色等优点。 　　染色体的荧光原位杂交技术最早是随着绘制高分辨人类基因组图谱需求而出现的，此后广泛应用于基因领域的基础研究。随着医学的发展，FISH这项原本用于基础研究领域的技术已经被迅速推广应用于临床。目前已被广泛应用于多种肿瘤的诊断、治疗等。例如HER2基因扩增的双色FISH评估技术能够预期乳腺癌的预后并指导靶向治疗。 　　2 膀胱癌的染色体畸变研究现况 　　肿瘤的染色体畸变是肿瘤病因学研究的重要内容，早期采用传统显带技术进行研究。FISH技术的出现则弥补了传统显带技术仅能用于分析中期分裂相的缺点，其在检测肿瘤染色体畸变或确定畸变染色体断裂点等方面具有重要价值。 　　国外的研究人员通过对膀胱癌肿瘤组织的FISH分析，发现膀胱癌在其发生发展过程中，容易发生非随机的染色体改变，包括染色体结构的畸变及染色体数目的异常，并提出，染色体畸变可能是膀胱癌发生发展的原因，对膀胱癌细胞中的染色体异常进行检测，可以为膀胱癌的临床诊断与治疗提供有价值的依据。 　　国外的许多学者通过FISH技术检测膀胱癌组织中的染色体畸变进行了研究：Kruger及Gallucci等学者通过对膀胱癌患者的石蜡组织切片的FISH研究发现，在膀胱癌组织中，第3、7、17号染色体存在较高的多倍体发生率，且其中的部分染色体畸变形式与膀胱癌的分级及分期相关[4]。目前已知的p16抑癌基因定位于9p21，与细胞周期的调控有关。有国外的文献报道在膀胱癌中9p21的畸变率为高达83%。这些都证实了染色体的畸变参与了膀胱癌的发生及发展的过程。 　　国内的学者针对国内患者膀胱癌组织的FISH分析提示中国人群与欧美人群膀胱癌的基因行为有一定的差异，但第3、7、9、17号染色体仍然参与了膀胱癌的发生及发展。马红爽等对国内不同分期的膀胱癌患者的尿液肿瘤脱落细胞进行FISH检测发现，中国人群的膀胱癌尿脱落细胞中存在较高的3、7、9p21及17染色体变异率，且部分染色体畸变形式与膀胱癌的分级有明显关系[5]。赵友光等学者的研究也证实了在国内的膀胱癌患者中，9、17号染色体上的部分基因片段参与了膀胱癌的发生[6]。充分证实了对第3、7、9p21及17染色体畸变的研究可以为膀胱癌的诊断及治疗提供一定的线索。 　　但目前除了第9p21染色体畸变主要表现为p16抑癌基因的改变，已证明其与细胞周期的调控有关，第3、7、17号染色体的畸变参与膀胱癌发生及发展的具体作用仍不明确，这也是未来膀胱癌的基因研究的一个方向。 　　3 尿脱落细胞的FISH检测在膀胱癌诊断及复发监测中的应用 　　早在2000年，Halling[7]等就已综合了以往的研究结果，研发了检测针对第3、7、9p21、17染色体畸变的UroVysionFIS试剂盒，在美国已用于膀胱癌的诊断。国内北京金菩嘉公司也生产了针对上述标记位点的膀胱癌检测试剂盒。国内部分医院已将尿细胞FISH检测作为膀胱癌诊断的参考指标，针对该试剂盒的临床价值，众多的国内外的学者进行了研究。 　　3.1尿脱落细胞的FISH检测与膀胱癌的诊断 膀胱癌的诊断包括定性