隐睾症与生殖细胞肿瘤关联性病理研究.docVIP

隐睾症与生殖细胞肿瘤关联性病理研究 　　【摘要】目的：通过对隐睾患者检测神经细胞粘附分子（NCAM）及转录因子Oct-4蛋白，探讨隐睾症与生殖细胞肿瘤的关联性。方法：搜集入住我院的隐睾症的患者，采集隐睾睾丸标本，并进行睾丸活检，检测NCAM、Oct-4的表达；并分析两个指标的表达与隐睾位置和年龄的相关性。结果：NCAM在人隐睾中的表达与年龄组、睾丸位置无相关性（P0.05）。但是大于5岁后隐睾内生精小管NCAM阳性表达有增高趋势。不同年龄组NCAM表达存在显著差异性（P0.05）。Oct-4与NCAM生精小管内同时阳性表达有4例，其年龄及睾丸位置分布无规律。结论：NCAM、Oct-4在人隐睾中存在病理性表达，NCAM和Oct-4可作为临床预测隐睾患儿生殖潜能和睾丸癌变的筛查指标。 　　【关键词】隐睾；神经细胞粘附分子；转录因子Oct-4；不育；癌变 　　【中图分类号】R679+. 22【文献标志码】A 　　隐睾是一种常见的男性不育疾病，发病率高达3%～4%，且其发病率有升高的趋势＼[1，2＼]。临床医学研究已广泛关注隐睾症与癌变、不育的关系，有文献报道隐睾症引起了的生殖细胞肿瘤的概率是正常人的20～40倍＼[3＼]，引起约30%的睾丸肿瘤，是生殖细胞癌变的主要原因之一。特别是有人指出，即使将睾丸放入阴囊，也并不能改善隐睾患者的“不育、癌变”趋势＼[4＼]。有研究认为， 生殖母细胞迁移障碍或者分化延迟，不能形成足够的精原细胞池，是隐睾患者“不育”及“癌变”的最关键的环节，而Oct-4及NCAM的表达，在这关键环节起重要作用。本组资料采用免疫组化方法对隐睾患者的NCAM、Oct-4进行分析，探讨其与患者睾丸位置、年龄之间的相关性。 　　1资料与方法 　　1.1临床资料 　　本研究以2011年10月至2012年前来我院体检的48例隐睾患者为研究对象，单侧患者41例，双侧患者7例，手术年龄在0.5～13.1岁之间，平均年龄为3岁。经伦理委员会批准，获得患者家属知情同意条件下，共搜集50个睾丸标本，在单侧患者只取患侧共41个，双侧患者只取一侧共5个，取双侧者共2例4个。其中腹股沟型标本共21例，外环口型标本共14例，内环口型标本共10例，皮下型标本共5例。 　　1.2组织病理学检测 　　采用冰冻切片免疫组织化学方法进行睾丸组织病理检测。手术切除睾丸组织，置冰冻切片机载物台上，-22℃快速冷冻后，切片，将切片贴附于涂有APES胶的玻片上，用冷丙酮固定5s后晾干切片，再用Tris-HCL缓冲液洗10s，滴加细胞角蛋白即用型抗体于水平位置的玻璃片上，将组织覆盖，将盛有玻璃片的试剂盒放入43℃冰箱内孵育3min，用Tris-HCL缓冲液洗3次，每次10s，DAB显色，显微镜下控制染色强度，用Mayers苏木素复染20s，水洗后用梯度酒精脱水，二甲透明，封片，观察结果。设备及试剂盒由我院病理科提供。 　　结果判定：（1）NCAM阳性：新生鼠睾丸NCAM阳性免疫组化染色片作阳性对照，染色阳性信号为棕黄色，位于细胞膜。（2）Oct-4阳性判断：以成人精原细胞瘤阳性免疫组化染色片作阳性对照，染色阳性信号为棕黄色，位于细胞核。 　　1.3统计学 　　统计学软件是SPSS17.0，不同组之间的差异比较采用方差分析，连续型变量两组间比较采用t检验，不符合正态分布的采用秩和检验，率的比较采用Fisher确切概率法/χ2检验。P0.05有统计学意义。两两比较应用Bonfrroni法，校正检验标准=0.05/检验次数。 　　2结果 　　2.150个睾丸中生精小管内NCAM、Oct-4病理表达规律及NCAM在隐睾生精小管和睾丸间质内表达NCAM生精小管（-）、睾丸间质（+）有21例，占42%；NCAM生精小管内（+）、睾丸间质（+）有13例，占26%；NCAM生精小管内阳性表达（+）、睾丸间质表达（-）有2例，占4%。NCAM在生精小管内（-）、睾丸间质（-）有14例，占28%。生精小管中NCAM（+）、Oct-4（-）有11例，占22%；生精小管中NCAM（+）、Oct-4（+）有4例，占8%；生精小管中NCAM（-）、Oct-4（+）有2例，占4%；总共17例，约34%在隐睾生精小管内病理性表达。见表1、表2。 　　2.2NCAM生精小管内表达、间质内阴性表达与年龄的相关性NCAM在人隐睾生精小管中的表达与年龄组无相关性（P0.05）。但是大于5岁后隐睾内生精小管NCAM阳性表达有增高趋势。不同年龄组NCAM间质内阴性表达存在显著差异性（P0.05），小于1.6岁年龄组与大于5岁年龄组间存在显著差异性（P0.017），余年龄组间无显著差异性。见表3。 　　2.3NCAM生精小管内表达、间质内阴性表达与年龄的相关性Fisher确切