二甲双胍联合放疗诱导结直肠癌细胞凋亡的分子机制研究-肿瘤学专业论文.docxVIP

目 录 中英文缩略词表 中文摘要 英文摘要 前言 材料和方法 结果 讨论 结论 参考文献 致谢 综述 中英文缩略词表 英文缩写 ADORA1 英文全称 Adenosine A1 Receptor 中文 腺苷 A1 受体 AMP Adenosine monophosphate 单磷酸腺苷 AMPK AMP activated protein kinase 腺苷酸活化蛋白激酶 ATP Adenosine triphosphate 三磷酸腺苷 ATM Ataxia-telangiectasia mutation 毛细血管扩张性共济 失调症 Bcl-2 cAMP B-cell lymphoma-2 Cyclic adenosine monophosphate B 淋巴细胞瘤-2 基因 环磷酸腺苷 Caspase Cysteinyl aspartate specific protein 半胱氨酸天冬氨酸特 异性蛋白酶 CC Compound C 腺苷酸活化蛋白激酶 抑制剂 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 DPCPX DSB 1,3-dipropyl-8-cyclopentylxanthine Double-Strand Break 腺苷 A1 受体拮抗剂 双链断裂 FBS Fetal Bovine Serum 胎牛血清 FCM Flow cytometry 流式细胞术 GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 dehydrogenase h Hour 小时 IR Ionizing Radiation 电离辐射 Met Metformin 二甲双胍 min Minute 分钟 ml Milliliter 毫升 mRNA messenger RNA 信使 RNA mTOR Mammalian target of rapamycin 哺乳动物的雷帕霉素 靶体 OD Optical density 光密度 英文缩写 PAGE 英文全称 Polyacrylamide gel electrophoresis 中文 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液 PI Propidium iodide 碘化丙啶 PVDF polyvinylidene fluoride 聚偏二氟乙烯 RPMI-1640 qRT-PCR rpm Rose Park Memorial histitute-1640 Real time Quantitative PCR Rotation per minute RPMI-1640 培养基 实时定量 PCR 每分钟转速 SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基磺酸钠 TEMED N,N,N,N-Tetramethyl ethylenediamine 四甲基乙二胺 二甲双胍联合放疗诱导结直肠癌细胞凋亡的分子机制研究 中 文 摘 要 目的： 观察 ADORA1 基因在二甲双胍联合放疗诱导结直肠癌 SW480 和 HCT116 细胞增殖凋亡作用，并探讨其可能的相关机制。 方法： 1、运用基因表达谱芯片技术分析人结直肠癌 SW480 和 HCT116 细胞在对照 组、单用二甲双胍组、单用 X 射线组、二甲双胍联合 X 射线组中基因的表达差 异，筛选出有明显差异且与凋亡相关的表达基因，为本研究的后续研究做好准备 以及机制研究提供新的线索。 2、应用平板克隆形成实验和流式细胞术检测单用二甲双胍、单用 X 射线、 二甲双胍联合 X 射线、二甲双胍联合 DPCPX（ADORA1 抑制剂）等不同干预后 人结直肠癌细胞的生存及凋亡情况。 3、采用定量 PCR 验证基因芯片的分析结果，同时检测细胞在不同方式处理 后，细胞中 ADORA1、Caspase3、Caspase9、Bcl-2 的 mRNA 表达情况。 4、应用 Western Blotting 检测不同方式处理细胞后相关蛋白的表达情况。 结果： 1、平板克隆形成实验结果显示：单用二甲双胍（1mmol/l）能抑制细胞的生 存能力，而二甲双胍（1mmol/l）与 DPCPX 的联合组对细胞生存能力的抑制作 用明显低于单用组，二甲双胍联合 DPCPX 组对细胞的克隆形成抑制明显低于单 用二甲双胍时，且差异有统计学意义（P0.05）。 2、流式细胞术检测结果显示：细胞在单用二甲双胍组或二甲双胍联合 X 射 线组中加入 DPCPX 后，诱 导细胞的凋亡率均明显下降 ，且有统计学差异 （P0.05）。 3、定量 PCR 结果显示：验证了基因芯片的结果，在二甲双胍（1mmol/l） 与 X 射线（8Gy）联合组 ADORA1、Caspase3、Caspase