高产纤维素酶菌株的筛选及其在青贮饲料中的应用研究-应用微生物学专业论文.docxVIP

高产纤维素酶菌株的筛选及其在青贮饲料中的应用研究 摘要 纤维素是地球上最廉价、最丰富的可再生资源，全世界每年的纤维素及半纤 维素的生成量为850亿吨，由于纤维素具有水不溶性的高结晶结构，再把它水解 成可利用的葡萄糖相当困难。利用微生物产生的纤维素酶来分解和转化纤维素则 是其利用的有效途径。目前人们对纤维素酶的研究多集中于霉菌，但霉菌多为好 氧性微生物，而青贮饲料发酵是在少氧或缺氧环境中进行的，故筛选产纤维素酶 活高的厌氧及兼性厌氧细菌更具有应用上的现实意义。 本研究从自然界野牦牛粪中分离出三株高产纤维素酶细菌菌株YMN8、 YMN30、YMN41，经鉴定结果三株菌为芽孢杆菌属细菌，YMN8为短小芽孢杆 菌(Bacilluspumilus)、YMN30为多粘芽孢杆菌(Bacilluspolymyxa)、YMN41为凝结 芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。DNS法测纤维素酶活，单一培养后的纤维素酶活 分别为3752U／ml、3910U／ml和3975U／m1；经拮抗试验证明这三株细菌菌株间无 拮抗作用，组合培养后纤维素酶活有明显提高，最后确定三组合培养其纤维素酶 活达到最高为4210U／ml。通过正交试验结果得知，接种量对产酶的影响较大，氮 的含量和水的含量影响较小，从而确定了三组合细菌菌剂接种量在0．1％时产纤维 素酶活最高。同时，实验确定了将筛选出来的高产纤维素酶细菌与乳酸菌、酵母 菌的微生物固体菌剂按1：2：2的混合配比，加入0．5％的尿素，添加到全株玉米 青贮原料中，发酵30天后，感官评定为1级优良；与对照组相比，其中干物质(DM) 含量提高了11．67％，粗蛋白(CP)含量提高了16．2％，中性洗涤纤维(NDF)和酸性 洗涤纤维(ADF)的含量分别降低了16．63％和15．85％，PH为3．54。 通过奶牛喂养试验，对30头中国荷斯坦泌乳牛在相同的饲养条件下进行了30 天饲养对比试验。与对照组相比试验组平均日产奶量增加了3．85％。此外，试验 组所产牛奶的各种乳指标也均有提高，与对照组相比乳脂含量增加2．51％、乳蛋 白含量增加6．40％、乳糖含量增DH2．93％，同时提高了试验组奶牛的免疫抗疾病 能力。 关键词：高产纤维素酶菌株筛选 固体发酵 青贮饲料  Studies on Screening of Cellulase High Producing Bacteria and Applying to the Silage Abstract Cellulose is the cheapest and the most abundant regeneration resource on the earth．the create capacity of the cellulose and hemicellulose is reach to 85 billion ton． Because of the cellulose has the high crystal structural which have water insolubility, it is very difficult to translate for available Glucose．Using the cellulase which produced by the microbiology to decompound and translate the cellulose is an efficacious way．at present people on the research of cellulase are mostly concentrated on the Mildew,but the most of Mildew is the microbiology which need the oxygen and the silage fomentation is going on the condition of little or no oxygen，SO screening the higll producing cellulase bacteria which the growing course is not need or little need the oxygen have the big practical significance on the application． The study have screened three bacteria strains YMN8 YMN30 YMN41 from the feces of wild yak on the nature，after the iden