单羰基姜黄素类似物b19的抗肿瘤作用及其分子机制研究中药学专业论文.docxVIP

温州医学院硕士学位论文单羰基姜黄素类似物B19的抗肿瘤作用 温州医学院硕士学位论文 单羰基姜黄素类似物B19的抗肿瘤作用 及其分子机制研究 中文摘要 目的 1．研究B19对非小细胞腺癌A549细胞增殖活性的影响，对A549细胞克隆、 细胞凋亡的影响；对ER Stress信号通路CHOP及相关蛋白表达的影响。 2．研究B19对卵巢癌细胞株A278、CP70细胞增殖活性的影响，对细胞凋亡率 的影响；以及通过ER Stress及ROS途径诱细胞凋亡的影响。 方法 1．检测肿瘤抑制情况：体外培养A549、A278、CP70细胞株，采用MTT法检测 化合物对其的增殖抑制作用。 2．检测内质网应激相关蛋白表达情况：Western blot法检测上述细胞在姜黄素及 其类似物．B19作用下内质网应激相关蛋白表达情况。 3．检测凋亡及其周期情况：用Annexin V／PI染色，流式细胞术检测细胞凋亡及 其周期的情况。 4．观察A549细胞株克隆的形成：肉眼观察同等少量A549细胞株在活性化合物 作用同等时间下的克隆形成情况．。 5．检测ROS相关情况 6．检测Caspase一3 结果 1．B19对非小细胞腺癌A549的作用与机制： 1．1．MTT结果显示B19可抑$1]A549细胞，并具呈剂量依赖性，在浓度为20 mM 时，对细胞株增殖的抑制作用明显增强。 1．2流式细胞仪检测显示，与阴性对照DMSO相比，B19可明显诱导A549细胞凋 亡。证实B19抗肿瘤活性发挥作用是通过凋亡途径进行的。 1．3通过平板克隆实验我们发现，A549细胞的克隆形成能力随B19浓度的增高 而降低，可以认为B19对肺腺癌的生长有显著的抑制作用。 1．4 Western blot分析显示，A549在姜黄素及其类似物作用下，内质网应激相关 4 温州医学院硕士学位论文 温州医学院硕士学位论文 蛋白均表达，其抗肿瘤作用可能与内质网应激有关。 2．B19对卵巢癌A2780、CP70的作用与机制： 2．1 MTT结果显示B19可抑制A2780、CP70细胞，并具呈剂量依赖性，在浓度为 20．M时，对细胞株增殖的抑制作用明显增强。 2．2流式细胞仪检测显示，与阴性对照DMSO相比，B19可明显诱导A2780、CP70 细胞凋亡。证实B19抗肿瘤活性发挥作用是通过凋亡途径进行的。 2．3通过ROS检测试验我们发现，ROS细胞透性的指标DCF-DA，对B19剂量依 赖。证实B19可通r血os途径诱导细胞凋亡。 2．4 Western blot分析显示，A2780、CP70在姜黄素及其类似物作用下，内质网 应激相关蛋白均表达，其抗肿瘤作用可能与内质网应激有关。 2．5通过Caspase一3检测试验我们发现，我们发现，用209M B19处理2411的CP70 细胞Caspasc．3的激活量明显加强，然而姜黄素不增强。 结论 1．B19通过ER Stress诱导A549细胞的凋亡。 2．B19通过ER Stress诱导卵巢癌细胞的凋亡，姜黄素对A2780细胞的抑制作 用强于CP70，B19对A2780、CP70的抑制作用都要强。 关键词 单羰基姜黄素类似物；抗肿瘤；内质网应激途径。 温州医学院硕士学位论文英文摘要 温州医学院硕士学位论文 英文摘要 Anti—tumor molecular mechanism of B 1 9 Objective 1．B 1 9 on the proliferative avtivity of non-small cell adenocarcinoma cell line A549； the A549 cell clones；apoptosia；impact on the express of ER Stress signal pathway CHOP and relied proteins． 2． B 1 9 on ovarian cancer cell line A278，CP70 proliferative activity,apoptosis rate； andapoptosis induced by ER Stress and ROS pathways． Methods 1．Study the influence ofBl9 on the colony formation：we treat the cell with the B19 for two weeks．The ability of cell clone formation was detected by the plate colony forming assay． 2．Study of dose-effect relationship：we study their anti