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冬眠及非冬眠棕黑锦蛇血细胞比较观察 摘要：为了研究蛇类在冬眠和无冬眠状态下血细胞的适应 性，以辽宁地区产的棕黑锦蛇为研究对象进行观察计数。实 验结果，冬眠组红细胞体积小于无冬眠组。白细胞中冬眠组 淋巴细胞最多，无冬眠组单核细胞最多。结论，棕黑锦蛇在 冬眠和无冬眠时，血细胞有着明显的适应性变化。 关键词：棕黑锦蛇 血细胞 形态学参数 冬眠，对于爬行动物来说是一种极其重要的对环境的适 应行为。血液作为运输营养和氧气的重要载体，其的变化是 不可忽视的。对蛇类外周血细胞的已有较多的研究(李丕鹏, 1997；吴孝兵等，1998；李殿伟等，2007),而有关冬眠对 爬行动物的血液学的研究，目前国内还没有相关的报道。本 文对棕黑锦蛇(Elaphe schrenckii)幼体冬眠与非冬眠的 血液形态等进行观察分析，旨在提供更多有关棕黑锦蛇生物 学基础资料。 1材料与方法 实验用棕黑锦蛇均为2011年8月份孵化个体，冬眠组 和无冬眠组设置温度分别为6°C和25°C,湿度为60%o 2012 年2月中旬冬眠组和无冬眠组各选取一条体表无损伤，大小 相当的健康幼蛇，乙瞇麻醉后，在近心脏部位剪开腹壁，暴 露心脏，心房采血制作血涂片。涂片自然风干后，瑞氏染液 染色，运用0LYMPUS显微镜观察、测量、白细胞分类计数。 2结果 棕黑锦蛇血细胞与其他爬行动物一样均包括红细胞、白 细胞和血栓细胞，其中白细胞又可分为三种：单核细胞、淋 巴细胞和粒细胞（嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒 细胞、嗜天青粒细胞）。 1红细胞 冬眠组棕黑锦蛇幼蛇的成熟红细胞及胞核均呈椭圆形， 胞质嗜酸性，染色均匀，胞核位于细胞中央，结构较致密， 嗜碱性，着色深。 无冬眠组与冬眠组的棕黑锦蛇外周血红细胞，虽然在胞 质和胞核的着色特性方面基本相近，但由长径与短径的比值 可以看出无冬眠组红细胞（1.6）明显较冬眠组红细胞（1.52） 长大，红细胞呈长椭圆形。无冬眠组红细胞核，长径与短径 比值（2.27）较冬眠组的（1.46）表现出更加明显的拉长。 另外，在无冬眠组中，红细胞核呈现较多的不规则形状，如 细胞核内有圆形空泡或者有胞核周边有大小不等的突起等。 2.2白细胞 实验观察的冬眠组和无冬眠组的棕黑锦蛇白细胞中，数 量最多的均为是淋巴细胞和单核细胞，分别占白细胞总数的 67%和76%。但在冬眠组中淋巴细胞占优势，而无冬眠组中单 核细胞占优势。在粒细胞中，冬眠组略高于无冬眠组。 细胞形态上，单核细胞胞质较丰富，呈灰蓝色；核肾形, 位于细胞一侧，呈蓝紫色。淋巴细胞大多呈圆形，胞核为不 规则的圆形，呈蓝紫色，染色较均匀。嗜中性粒细胞是白细 胞中体积最大的一种，多为圆形，胞质丰富，内含大量形态、 大小各异的颗粒。嗜天青粒细胞近圆形，胞质内含有丰富的 染成浅紫蓝色的颗粒，胞核椭圆形常位于细胞的一侧。嗜碱 性粒细胞是白细胞中体积最小的，细胞圆形或椭圆形，胞质 中充满嗜碱性颗粒，呈蓝黑色或深紫色，颗粒聚集在细胞表 面。 3血栓细胞 棕黑锦蛇的血栓细胞呈长卵圆形，比红细胞小。细胞核 椭圆形或卵圆形，位于细胞中央，呈蓝紫色，细胞质较少， 呈浅蓝灰色。血栓细胞常聚集成群，大约2-9个一群。 3讨论 1红细胞大小 红细胞在循环血中承担这重要运送氧气的作用，其细胞 大小的变化与其机能状态、气候变化、海拔高度等因素有着 密切的关系。对四眼斑水龟外周血红细胞的研究（傅丽容等, 2004）以及程备久等（程备久等，1996）在鳖血细胞数量的 季节变化及形态结构研究中均印证了上述结论。在高温季节 8月份，四眼斑水龟外周血红细胞体积（雄性， 27. 35±0. 66um）明显大于 1、3 月份（雄性，22. 51±0. 18um； 20. 32土0. 26um）o对于棕黑锦蛇外周血红细胞在冬眠组（低 温）表现为体积小，无冬眠组（高温）则是体积大。而且李 殿伟等（李殿伟等，2007）提供黑龙江棕黑锦蛇（5-8月份） 外周红细胞测量参数相比较，冬眠组和无冬眠组红细胞的长 短径的比值小于其的数值。这种数值差异是否与不同地理居 群之间的累积变化，以及不同季节和温度下红细胞的适应性 调整有关，还是由于棕黑锦蛇实验观察个体数不足而引起的 误差等需要进一步探讨。 3.2单核细胞与淋巴细胞 白细胞在参与机体的特异和非特异防御机制中起重要 作用，特别是淋巴细胞和嗜中性粒细胞、单核细胞。幼体棕 黑锦蛇的单核细胞与淋巴细胞含量高，几乎占白细胞总数的 80% （非冬眠）或70% （冬眠），说明在棕黑锦蛇幼体阶段无 粒细胞（单核细胞与淋巴细胞）对机体防御能力起着重要的 作用。 李殿伟等（李殿伟等，2007 ）报道了棕黑锦蛇 （Elapheschrenckii ）等10种成体蛇白细胞的分类比值。 其中棕黑锦蛇的淋巴细胞、单核细胞和粒细胞分类百分比与