姜黄素及非甾体类抗炎药抗胰腺癌的实验研究-中西医结合临床专业论文.docxVIP

姜黄素及非甾体类抗炎药抗胰腺癌的实验研究博士研究生：宫爱霞 姜黄素及非甾体类抗炎药抗胰腺癌的实验研究 博士研究生：宫爱霞 指导教师：关凤林 教授 专业名称：中西医结合，临床 摘 要 胰腺癌是恶性度很高的消化道肿瘤，近40年发病率呈稳步上升趋势，5年生 存率仅为l--4％，发病率与死亡率几乎一致。目前缺乏有效的临床治疗手段。 对于很多实质性肿瘤，包括胰腺癌，基于预防目地的努力较之对肿瘤的治疗 收效更大。因此，探索有效的化学预防手段对降低胰腺癌的发病率及死亡率极其 重要。 化学预防是指化学药物或天然药物对致癌过程的预防、抑制、中断、或逆转。 非甾体类抗炎药(nonsteroidal anti inflammatory drug，NSAIDs)除了具有抗 炎、解热、镇痛和抗血小板聚集作用外，尚有抗肿瘤增殖和诱导肿瘤细胞捌亡的 作用，这些药物对消化道肿瘤的化学预防作用已被许多研究证实，但对胰腺癌的 防治作用，目前知之甚少，而且结论尚不统一。姜黄素(Curcumin，Cur)是一种 从姜科植物姜黄中提取的酚性色素，具有一定的非甾体类抗炎药的特性，现已证 明其有强烈的抗氧化、抗突变和抗癌作用；目前对其抗癌作用的研究主要集中在 肿瘤化学预防方顽，美国国立肿瘤所已将其列为第3代癌化学预防药。 本文的研究目的旨在观察比较姜黄素、非选择性和选择性非甾体类抗炎药对 胰腺癌的体外抑制作用，探讨姜黄素和非甾体类抗炎药联合应用是否有协同作用、 姜黄素能否减少非甾体类抗炎药的用量，从而降低非甾体类抗炎药的不良反应： 并对姜黄素、非甾体类抗炎药抗肿瘤的分子机制作了初步探讨。主要结果如下： 第一篇胰腺癌组织中环氧合酶一2、Survivin的表达及意义 1．目的：探讨环氧合酶一2(cyclooxygenase一2，COX一2)、Survivin在人胰 腺癌组织中表达情况及与胰腺癌的关系。 2．方法：石蜡包埋的胰腺癌组织48例，慢性胰腺炎组织10例，正常胰腺组 织5例，全部病例术前均未做化疗和放疗。应用日jVision‘忱US法行免疫组织化 学染色，分别用兔血清和0．01MPBS代替一抗，以确定其特异性和可靠性。根据胞 浆或胞核的染色强度和染色细胞比剜，结果用阴性、弱阳性、阳性、强阳性表示。 应用SPSSl0．0软件进行秩和检验。PO．05有统计学意义。 ·T’ 3．结果：胰腺癌组织中COx一2的阳性表达率(83．33％)明显高于慢性胰腺 3．结果：胰腺癌组织中COx一2的阳性表达率(83．33％)明显高于慢性胰腺 炎组织(30％)，正常胰腺无表达。慢性胰腺炎和正常胰腺组相比，两者之间无显 著差异(z=一1．316，p=O．1880．05)，胰腺癌与慢性胰腺炎相比，差异有显著性 (z=一3。647，p=O．0000．01)，胰腺癌与正常胰腺组相比，差异有显著性(Z一3，217， p-O，0】)：Survivin只在胰腺癌组织中表达，阳性表达率56．25％，慢’眭胰腺炎和正 常胰腺组织无表达。胰腺癌组织与正常胰腺组织相比，二者之间差异有显差性 (Z=-2．215，p=O．0270．05)，胰腺癌组织与慢性胰腺炎组织相比，二者之问差异 有显差性(z一3．050 p=O．020．05)。从组织学分型看，高分化和低分化腺癌之间， 无显著性差异(Z=一1，237 p=O．2160．05)：COX一2表达与Survivin表达具有协同 性。卡方检验发现COX一2表达和Survivin表达无显著性差异(X2=2．438， p=O．1180．05)。表明COX一2高表达时，Survivin也存在高表达。 4．结论：COX一2在人胰腺癌组织中的表达率明显高于慢性胰腺炎及正常胰腺 组织，并且以过表达为主；慢性胰腺炎有少量表达，以低表达为主，说明COX一2 参与了胰腺癌的发生及发展过程，同时也表明，慢性炎症刺激也可诱导COX一2表 达，推测在慢性胰腺炎中的COX一2表达，可能是促使慢性胰腺炎转化为胰腺癌的 因素之一；Survivin选择性地表达于胰腺癌组织，提示Survivin也参与了胰腺癌 的发生及发展过程：胰腺癌中COX一2和Survivin含量经常上调并共同表达，COX一2 表达增高时确实存在Survivin的表达失衡，这种表达失衡有可能在胰腺癌发生、 发展中起一定作用。 第二篇环氧合酶2、Survivin在人胰腺癌细胞株的表达 1．目的：探讨环氧合酶2、Survivin在人胰腺癌细胞株的表达情况。 2．方法；以人胰腺癌细胞株PAN02为实验对象，用免疫细胞化学法、蛋白质 免疫斑点印迹法检测COX一2和Survivin蛋白质水平的表达，用RT-PCR法检测COX 一2和Survivin mRNA水平的表达。 3．结果：免疫细胞化学染色显示，cOx一2、Survivin蛋白在人胰