姜黄素和地西他滨对菊花DNA甲基化及生长发育的影响-遗传学专业论文.docxVIP

关于学位论文独创声明和学术 诚信承诺 本人向河南大学提出硕士学位申请.本人郑重声明 :所呈交的学位论文是本人在导 师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、 标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其 他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料.与我一同工作的同事对 本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意. 在此本人郑重承诺:所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负. 学位申请人(学位论文作者)签名:点在歧 2015 年仁月 4 日 关于学位论文著作权使用授权书 本人经河南大学审核批准授予硕士学位.作为学位论文的作者，本人完全了解并同 意河南大学有关保留、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息 机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论 文 (纸质文本和电子文本)以供公众检 索、查阅.本人授权河南大学 出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可 以采取影印、缩印 、扫描和拷贝等复制手段保存 、汇编学位论文(纸质文本和电子文本)。 (涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书) 斩获得者(学位论文作者)签名:是在去氓 2015 年5月Ib 日 学位论文指导教师签名: 树』 飞 摘 要 动植物的生长发育过程中伴随着遗传变异和表观遗传变异，从而引起动植物体形态 特征和生长发育的改变。本文以菊花（Dendranthema×morifolium）为研究材料，通过两 种不同的 DNA 甲基化抑制剂地西他滨和姜黄素的处理，利用 MSAP 和 cDNA-AFLP 分 子标记等方法，分析两种甲基化抑制剂对菊花表观遗传变异和基因转录组表达信息的影 响。同时，对菊花材料的生物学性状统计分析，对比组织培养和棉球涂抹两种处理方法 结果的差异，以期寻求更加经济有效的处理方式。取得的研究结果如下： （1）浓度分别为 0 μmol/L（对照）、100 μmol/L、200 μmol/L 和 400 μmol/L 的姜黄 素处理菊花“神马”，经组织培养处理一个月后，甲基化敏感多态性扩增（MSAP）分析， 基因组全甲基化比率分别为 58.40%、50.44%、48.24%和 46.00%。菊花生长的整个生命 周期内，组培初期表型变化明显，与对照相比，100 μmol/L、200 μmol/L 和 400 μmol/L 处理组株高分别降低 0.82 cm、1.08 cm 和 1.35 cm；丛生芽数量分别减少 0.41、0.75、1.48 个，叶片数分别减少了 6.00、9.00、13.44 个，叶色泛黄程度较为严重，移栽后逐渐恢复， 但对株高和 DNA 甲基化的抑制作用仍然存在。棉球涂抹处理扦插菊花材料后，其 DNA 甲基化比率随浓度的升高而降低。 （2）姜黄素处理材料两种不同方式对比：组织培养和棉球涂抹两种方式产生的表 观遗传变异不同，组织培养后产生的变异率大于棉球涂抹后产生的变异率；两种处理方 式对植株的胁迫程度不同，棉球涂抹后出现“柳叶头”，且处理组大部分材料受蚜虫侵 害严重。两种处理方式都能使花期不同程度提前，其中浓度为 200 μmol/L 时处理效果最 好，可提前 5-8 天左右。 （3）姜黄素处理组培材料 cDNA-AFLP 分析结果显示：浓度 100 μmol/L、200 μmol/L 和 400μmol/L 处理组分别产生 26、38、4 条表达特异性条带，与处理浓度没有明显的正 相关性。 （4）浓度为 0 μmol/L（对照），50 μmol/L，100 μmol/L，150 μmol/L 地西他滨处理 菊花“紫精灵”，处理组织培养材料后，其株高均值分别为 3.57 cm、2.95 cm、2.99 cm 和 1.71 cm；丛生芽数分别为 3.91、3.25、2.83 和 1.83；叶片数分别为 30.83、27.08、20.58 I PAGE PAGE IV III III 和 16.66。组培材料各组甲基化比率分别为 51.16%、49.57%、48.18%和 43.54%。扦插 材料各浓度组 DNA 甲基化比率分别为 51.60%、48.43%、46.54%和 42.78%，组培材料 的 DNA 甲基化抑制程度大于扦插材料。扦插材料花期不同程度的提前，100 μmol/L 地 西他滨处理效果最好，花期可提前 3-5 天左右，患病率和虫害感染率较高。 关键词：DNA 甲基化，姜黄素，地西他滨，菊花 ABSTRACT Epigenetic and genetic change can lead to changes in morphology and growth of animals and pla