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壳寡糖季铵盐的制备和诱导抗稻瘟病的初步研究
摘要:分别以壳聚糖和壳寡糖与2,3 —环氧丙基三甲 基氯化铵反应,合成2—羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖和2 — 羟丙基三甲基氯化铵壳寡糖,经FT—IR和1H NMR 对其结构表征,电导滴定法测得取代度为3 0°%。在室内水 稻稻瘟病的诱导抗病实验中,以浓度为5 0 0 mg / L的 C 0 S-E T C溶液喷洒过的水稻秧苗在1周内对水稻稻 瘟病的抗病活性逐渐增强,并达到最高值的7 7. 2°%,明 显高于COS和CTS — ETC。
关键词:壳寡糖;季按盐;水稻稻瘍病;诱导抗病 中图分类号:S 4 3 5 . 6 7 2文献标识码:A文章 编号:0439— 8 11405—0942-04
Preparation of Quaternar y Ammonium Chi tool igosacch aride Their Induced
Resistance against Rice
Blast
ZHANG Wen-qing,FENG H u a feng, ZUO Ping — ping,XIAWei
Abstract: CTS—ETC and COS —ETC were synthesized via t he react ion of“CTS + ETC’’and “COS + ETC”, respectively, and structural ly characterized by FT— IR and 1 H N M R. The d e g r e e of substitution was 30% according to conductometric titra t i o n. The resistance activit
y of the rice seedling, whic h was sprayed by 5 0 0 m g / L CO S — E T C to induce the resistance a g a i n s t rice blast, increased g r adually within a week and re
ached the maximum of 7 7 . 2 %
which was obviously higher t h a n that obtained by COS or C T
S-E T C.
Key words: chi tool igosac c h a r i d e; quaternary ammoniu m salt; rice blast; induced r
esistance
壳寡糖是由2?1 0个氨基葡萄糖通过p-1, 4- 糖苷键连接而成的寡聚糖,是自然界中惟一大量存在的碱性 多糖一一壳聚糖的降解产物,具有水溶性好、安全无毒、易 吸收等优点。A 1 b e r s h e m等[1 ]首先提出COS 具有调控植物生长发育、繁殖、防病和抗病等功能,并认为 c 0 S将成为一类新型的植物生长激素,此后C 0 S的诱导 植物抗病性越来越受到人们的关注[2 ]。同时,C 0 S能 促进植物细胞活化、增强植物抗病能力和改善土壤微环境 [3 ]。胡健等[4,5 ]证实C 0 S对水稻的常见病害一一 稻瘟病和纹枯病具有一定的诱导抗病效果,但与市场上常见 的化学农药的防治效果相差甚远[6]。目前,壳寡糖衍生 物作为水稻诱导抗病激活剂的研究国内外鲜有报道。本研究 以COS与2, 3—环氧丙基三甲基氯化铵反应,得壳寡糖 衍生物,并初步研究了其对水稻稻瘟病的诱导抗病活性。
1材料与方法
1.1材料与试剂
水稻种子和水稻稻瘟病病菌;c T S [Mw =
1 4 0 0 0,脱乙酰度〉85 %]和 COS; 2,3
一环氧丙基三甲基氯化铵;其他试剂均为分析纯。
1. 2仪器与设备
D D S - 3 0 7 A型电导率仪;N i c o 1 e t 6 7 0 0傅立叶红外光谱仪;DNP- 9 0 8 2电热恒温恒湿培 养箱;A VANCE 5 0 0核磁共振波谱仪。
1.3试验方法
1.3.1壳聚糖季铵盐的合成根据L i m等[7] 的制备方法,将2 g CTS溶于50 mL l%HAc溶 液中,用4 0 °%N a OH溶液析出,静置8 h,离心后, 将沉淀物刮入三口烧瓶中,加入5 0 mL异丙醇一水溶液 为反应溶剂。将1 6 mL ETC—异丙醇溶液,分3次滴 加,每次滴加0. 5 h。反应温度为7 0 °C,反应2 0 h。 反应结束后,用丙酮一乙醇混和溶液沉淀,过滤,再用丙酮 洗涤3次。于4 5°C真空干燥2 0 h,得白色固体,产物 通过FT—IR和1H NMR进行表征。
1.3. 2壳寡糖季铵盐
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