不同浓度乳铁蛋白对原代大鼠成骨细胞增殖的影响.docVIP

前言 骨质疏松（osteoporosis）是一种以低估量和骨组织微结构破坏为特征，导致 骨骼脆性增加，出现腰背、四肢疼痛，脊柱畸形甚至骨折的全身性疾病[1]。成骨 细胞和破骨细胞之间的活动不平衡导致骨形成和骨吸收脱耦联是骨丢失的主要 原因。人口的老龄化加剧了骨质疏松患病率。据统计，目前全世界骨质疏松患者 已超过 2 亿，我国骨质疏松患者约 8400 万人[2]。骨质疏松增加骨折的风险，给 医疗和社会带来巨大压力，给家庭带来重大经济负担.骨质疏松已被公认为严重 的社会公共健康问题，越来越受到各国专家及学者关注。 骨质疏松在人群中的患病率高，呈逐年增长的趋势，是公认的严重的社会公 共健康问题，骨质疏松已然为老年人的常见病，同时也是老年人的主要医疗费用 [3]。目前，国内外临床上防治骨质疏松症的药物以骨吸收抑制剂为主，如雌激素、 双磷酸盐等，这类药物主要通过抑制破骨细胞活性来降低骨转换而发挥作用，尽 管对增加骨密度和减少骨折发生有一定作用，但是绝经后骨质疏松妇女的骨密度 仍难以恢复到正常水平[4][5]。雌激素替代疗法可抑制骨质流失，促进骨更新，增 加骨密度，为防治绝经后骨质疏松的一线药物，尤其是绝经早期的妇女。然而， 雌激素会影响包括乳腺和子宫在内的其他组织器官，如雌激素过量致子宫内膜 癌，这些不良反应限制了雌激素的长期应用[6]。双磷酸盐是预防骨丢失和骨折的 最常用药物，其可增加骨密度，尤其是腰椎和股骨近端的骨密度。对已患骨质疏 松症的患者,双磷酸盐在减少椎骨骨折的发病风险的同时,也可以降低骸骨骨折及 非椎骨骨折发病风险[7]。但二膦酸盐可引起下颌骨坏死，还存在较多的副作用， 如过敏反应、胃肠道损害以及肝肾功能损害等。因此，寻找一种可刺激骨形成、 增加骨矿质密度的合成代谢制剂引起广泛的关注[8]。特立帕肽是一种甲状旁腺激 素部分重组体，属于合成代谢制剂，在骨质疏松的治疗中是已经被认证的[9]。我 们迫切需要更多、更深入的去研究、去发现其他的治疗药物。 乳铁蛋白是一种分子量为 80kDa 铁结合糖蛋白，其属于转铁蛋白家族，主 要存在于母乳、上皮分泌液及中性粒细胞次级分泌颗粒中，由外分泌腺分泌[10]。 正常人血清乳铁蛋白浓度为 2-7 x 10(-6) g/ ml，主要来源于中性粒细胞，因此炎症 期局部浓度较高[11]。乳铁蛋白是一种多效应因子，具有抗菌作用、免疫调节作 8 万方数据 用、促进细胞生长作用、抗氧化、抗肿瘤、参与铁代谢过程的作用12] 13]，[14]。更 重要的是，据相关研究表明，乳铁蛋白具有促进成骨细胞增殖、分化及抗成骨细 胞凋亡作用[15]，[16]，同时可抑制破骨细胞生成[17]。 近年来，体内研究[18]表明乳铁蛋白可促进骨生长。Guo HY[19]等发现，喂 养去卵巢大鼠乳铁蛋白 3 个月，防止了骨量和骨密度降低，增加了骨骼机械强度； 骨转换指标显示骨形成增加，骨吸收减少。高威[20]等用大小剂量乳铁蛋白喂养 去卵巢大鼠 12 周后检测大鼠股骨近端、脊柱骨密度值均升高，差异有统计学意 义，同时骨形态学改善了。Bharadwaj S[21]等在研究口服富含核糖核酸酶乳铁蛋 白对绝经后的妇女骨转换标志物影响中发现，补充富含核糖核酸酶乳铁蛋白后， 绝经后妇女的骨吸收明显降低，骨形成明显增加，在短期内（6 个月）恢复了骨 转换平衡。Bla is A[22]等研究，喂养去卵巢小鼠乳铁蛋白后，外周血可检测到有免 疫活性的乳铁蛋白，喂养 27 周后，骨密度和骨骼强度增加。 体外研究发现，通过体外成骨细胞的培养，生理浓度的乳铁蛋白能够有效 地促进成骨细胞增殖和分化，同时抑制成骨细胞凋亡。肖晖[23]等观察乳铁蛋白 对大鼠成骨细胞增殖分化的影响，结论是乳铁蛋白呈时间和浓度依赖性地促进成 骨细胞增殖和分化。Cornish J[18]等也证实乳铁蛋白能有效促进原代大鼠成骨细胞 的增殖。Taka ya ma Y 和 Mizumachi K[24]等研究表明,乳铁蛋白有效地诱导成骨细 胞系 MG63 细胞的增殖，还增加 ALP 活性和骨钙蛋白产量。Grey A[16]等通过 24 小时剥夺血清诱导原代大鼠成骨细胞凋亡，50%-70%的成骨细胞凋亡被抑制。 吴曼[25 ]等研究，通过设计乳铁蛋白实验分组 0.1ug/ml、1ug/ml、10ug/ml、 100ug/ml、1000ug/ml，发现乳铁蛋白的剂量在 1-100ug/ml之间，随着干预剂量 的增大，细胞数量随之增加，呈剂量-效应关系，而高剂量组 1000ug/ml 则抑制 成骨细胞的生长，得出 100ug/ml的乳铁蛋白在第 5天对成骨细胞的增值达到最 大的效应。这同 Cornish等 18的体外研究结果较相符，其研究表明，在生理浓度 条件下( 1-100ug/ml )，