（江苏专版）2017版高考生物一轮复习第十三单元基因工程（第41课时）基因工程概述讲义.pptVIP

江苏版生物 ;考纲内容;? 考点一　基因工程的工具——酶与载体 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)来源及化学本质:主要是从①??? ??中分离纯化出来的②???? ???。 (2)作用:催化作用,可重复利用;可用于DNA的切割获取③???? 和载体的切割。 (4)作用特点:特异性,即限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列,切割 ④???? ????。;(5)切割方式:包括错位切和平切。错位切是指产生两个相同的⑤???? ?;平切是形成⑥???? 。 2.DNA连接酶——“分子缝合针” (1)DNA连接酶的功能:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸间的⑦??? ??。 (2)DNA连接酶的种类:E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。 3.目的基因进入受体细胞的⑧　 ?——“分子搬运工” (1)概念:将外源基因??入⑨　 ???时所需要的运载工具。 (2)常用的载体:质粒、λ噬菌体的衍生物、⑩　 ???等。 (3)最常应用的载体:?　 ????。;考点二　基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取 方法:从①　 ????中获取;通过②　 ??扩增;通过 ③　 ????直接人工合成。 2.制备重组DNA分子 (1)制备重组DNA分子是基因工程中最核心、最关键的一步,在体外进行。 (2)基因表达载体的组成:启动子、目的基因、终止子以及④　 ????等。如图所示。;? a.启动子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端。是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA。 b.止子:是转录终止的一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。 c.记基因的作用:筛选、鉴别受体细胞是否含有目的基因。;(1)将目的基因导入植物细胞:⑤　 ????法、⑥　 ????法和 ⑦　 ??法。 (2)将目的基因导入动物细胞:采用最多,也是最为有效的方法是 ⑧　 法。 (3)将目的基因导入微生物细胞:一般选用Ca2+处理受体细胞使其成为 ⑨???? ????,然后再将这些感受态细胞和重组的基因表达载体混合于 缓冲液中,在温度适宜的条件下,感受态细胞吸收⑩　 ????,完成转化过程。;? ? 1.(2014江苏单科,23A)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。?( ) 2.(2013江苏单科,6A)设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列。?( );3.(2013江苏单科,6B)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。?( ) 4.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3~6个核苷酸序列。?( ) 5.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达。?( ) 6.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列。?( ) 7.基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点,供外源DNA插 入。?( ) 8.以大肠杆菌为受体细胞时,先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态。? ( ) 9.利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞。?( );突破一　有关基因工程的工具 ? 1.限制性核酸内切酶的作用分析 (1)限制酶的作用:限制酶具有专一性,表现在下列两个方面: ①识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。识别序列的特点:呈现碱基互补对称,无论是奇数个碱基还是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线,如图,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如:? 以中心线为轴,两侧碱基互补对称; 以 为轴,两侧碱 基互补对称。;? ②切割特定序列中的特定位点,使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平口末端。 a.黏性末端:当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端。 如:EcoRⅠ识别GAATTC序列,将G与A两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。如下图所示:;b.平口末端:当限制酶在它识别