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分光光度计简介 分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为： (1)200～400nm的紫外光区,紫外分光光度计; (2)400～760nm的可见光区,可见光分光光度计（或比色计）; (3)2.5～25μm的红外光区红外分光光度计或原子吸收分光光度计。 为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程，定期进行校正检定 仪器组成 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量 仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器（光电倍增管）和显示与存储系统组成 钨灯的发射光谱:400～760nm波长；氢灯（或氘灯）的发射光谱:185～400 nm波长 原理 单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式： A=-lg(I/I。)= -lgT=kLC 式中 :A 为吸光度；I。为入射的单色光强度; I 为透射的单色光强度, T为物质的透射率，k为摩尔吸收系数，L为被分析物质的光程，即比色皿的边长；c 为物质的浓度 注意事项 1．仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定 2．使用仪器前，应首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关 3．在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节 问题 1. 预热时，样品室暗箱盖的开闭问题 2. 测定过程的正确操作 * *