PVT1衍生的miR-1205通过靶向CDK3促进乳腺癌的侵袭转移.pdfVIP

来源于PVT 1 的miR- 1205 通过靶向CDK3 促进乳腺癌的侵袭转移 摘 要 乳腺癌是女性最为常见也是最为致命的癌症之一，其发病率高居各种肿瘤的首位， 而死亡率也位居第二。三阴乳腺癌由于缺乏激素受体作为治疗靶标，预后往往更差。乳 腺癌的早期发现、早期诊断，以及分子标志物和靶标的研究发现，成为攻克乳腺癌的关 键。 染色体 8q24.21 位点是人类乳腺癌癌中最常见的扩增区域，其中包含原癌基因 c- MYC ，lncRNA -PVT1 和多种microRNA （miR ）， 此microRNA 基因簇包括miR-1204， -1205，-1206，-1207-3p，-1207-5p 和-1208[1] ，它们的功能仍然不明确。利用荧光定量 PCR ，我们发现在包括三阴乳腺癌在内的乳腺癌恶性细胞系和发生转移的肿瘤原发组织 中，miR-1205 的表达水平明显上升。miR-1205 模拟物（mimics ）或 miR-1205 抑制剂 （inhibitor ）转染人乳腺癌细胞实验表明，miR-1205 促进三阴乳腺癌细胞等的侵袭转移。 microRNA 数据库分析结果提示，细胞周期蛋白依赖性激酶3 （CDK3 ）是 miR-1205 靶 基因，其结合位点通过荧光素酶报告基因实验证实位于CDK3 的3非翻译区 （3UTR ）。 进一步对乳腺癌临床样本进行分析，我们发现与miR- 1205 低表达的样本相比，miR-1205 高表达的样本中CDK3 蛋白表达明显降低。随后的挽救实验验证了miR-1205/CDK3 轴 促进乳腺癌的侵袭转移。对于调控机制进行研究，我们发现miR-1205/CDK3 轴通过EMT 信号通路促进细胞的侵袭转移，而EMT 信号通路的关键转录因子Snail 等的蛋白水平发 生明显变化。然后的免疫共沉淀实验发现Snail 与CDK3 相互作用，CDK3 促进Snail 经 泛素-蛋白酶体途径的降解。为研究miR-1205 的表达是否可能应用于乳腺癌的临床诊断， 我们收集了13 例正常人对照、21 例乳腺癌病人血浆，成功建立了检测方法，初步结果 显示乳腺癌特别是淋巴瘤转移的患者血浆中miR-1205 的表达较高，但需扩大样本量进 行分析。在体内实验研究中，我们构建了三阴乳腺癌细胞尾静脉转移小鼠模型，研究结 果提示miR-1205 敲低使三阴乳腺癌细胞的肺转移能力明显降低，但本实验观察时间不 够，需再次重复。 综上所述，我们发现miR-1205 通过直接靶向作用抑制CDK3 蛋白表达，从而削弱 了CDK3 介导的Snail 经泛素-蛋白酶体的降解，促进三阴等乳腺癌细胞的侵袭转移。我 I 来源于PVT 1 的miR- 1205 通过靶向CDK3 促进乳腺癌的侵袭转移 们的研究结果有可能为乳腺癌的诊断和治疗提供潜在的生物标志物和靶点。 关键词：乳腺癌，miR-1205，CDK3 ，EMT ，Snail II miR- 1205, processed from PVT1, promotes breast cancer metastasis Via inhibiting CDK3 Abstract Breast cancer is one of the most common and deadly cancers in women. It has the highest incidence of various tumors and the second highest mortality rate. The prognosis of triple negative breast cancer is often worse due to the lack of hormone receptors as therapeutic targets. Early detection and early diagnosis of breast cancer, as well as the discovery of mole