医学免疫学（第4版）第四章 抗体.pptVIP

第五节 人工制备抗体 一、多克隆抗体（polyclonal antibody, PcAb） 由不同B细胞克隆产生的针对多种不同抗原表位的抗体。 多克隆抗体产生的示意图 B3 B2 B1 B3 进入机体 B2 B1 克隆扩增 合成并分泌抗体 多克隆抗体 克隆扩增 合成并分泌抗体 Ab1 Ab2 Ab3 Ab1 Ab2 Ab3 单克隆抗体 进入机体 1 2 3 第五节 人工制备抗体 第五节 人工制备抗体 二、单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb） 由单一克隆杂交瘤细胞产生的只识别某一特定抗原表位的特异性抗体。 Cesar Milstein 1927―2002 Nobel Prize in 1984 Georges Kohler 1946―1995 Nobel Prize in 1984 建立杂交瘤技术，制备单克隆抗体 第五节 人工制备抗体 二、单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb） 单克隆抗体的制备原理 B细胞能产生抗体，但不易在体外培养； 骨髓瘤细胞能在体内、外无限增殖，但不能分泌抗体； 两者形成的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能合成和分泌特异性抗体。 B3 B2 B1 B2 B1 小鼠 骨髓瘤细胞 细胞融合(PEG) 选择培养（HAT培养基） B3 B2 B1 B2 筛选杂交瘤细胞 克隆化建株 B2 Ab1 Ab2 B3 Ab3 HAT培养基 H：次黄嘌呤 (Hypoxanthine) A：氨基喋呤 (Aminopterin) T：胸腺嘧啶核苷 (Thymidine) HGPRT + HGPRT－ HGPRT + 1 2 3 免疫 脾细胞 单克隆抗体制备示意图 第五节 人工制备抗体 二、单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb） 单克隆抗体特点和应用 结构高度均一； 特点： 特异性强； 易于大量制备； 少(或无)血清交叉反应。 临床疾病诊断； 应用： 分离纯化抗原； 鉴定细胞表面分子； 肿瘤导向治疗。 第五节 人工制备抗体 三、基因工程抗体（genetic engineering antibody） 尽可能降低单克隆抗体的鼠源性。 可变区与恒定区均为鼠源 可变区为鼠源恒定区为人源 CDR为鼠源 其余均为人源 借助DNA重组和蛋白质工程技术，在基因水平对Ig分子进行切割、拼接和修饰，重新组装而成的抗体分子，又称重组抗体。 Ab是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，是介导体液免疫的重要效应分子。 Ab基本结构由两条相同H链和两条相同L链通过链间二硫键连接而成，分为V区、C区和铰链区。 Ab功能与结构密切相关，除可直接阻止病原体入侵及中和毒素外、还可通过激活补体 (IgG、IgM）、介导调理和ADCC作用 (IgG）、参与Ⅰ型超敏反应 (IgE）、穿过胎盘 (IgG）和黏膜 (SIgA）发挥作用。 人工制备抗体包括多克隆抗体、单克隆抗体和基因工程抗体。 小 结 第四章 抗体 小 结 第四章 抗体 * * * * * * * * 第一节 抗体的结构 二、抗体功能区的结构及其主要功能 典型的“三明治样”立体结构。 抗体轻链可变区和恒定区结构示意图 L链功能区： H链功能区： VL、CL IgG / IgA / IgD：VH、CH1、CH2、CH3 第一节 抗体的结构 二、抗体功能区的结构及其主要功能 IgM / IgE：VH、CH1、CH2、CH3、CH4 VL VH CL CH1 CH2 CH3 IgM IgE 抗体功能区 第一节 抗体的结构 二、抗体功能区的结构及其主要功能 5.IgG的CH3、IgE的CH2和CH3： 4.IgG的CH2： 3.IgG的CH2、IgM的CH3： 2.CH和CL： 抗体同种型和同种异型遗传标志 激活补体经典途径 介导IgG通过胎盘 亲细胞活性 1.VH和VL： 各功能区的主要功能 特异性结合抗原 第一节 抗体的结构 三、J链和分泌片 1. J链 (joining chain) 由浆细胞合成的一条富含半胱氨酸的多肽链。 可将单体Ab分子连接为二聚体(SIgA)或多聚体(IgM)。 J链 IgM SIgA IgM电镜图 SIgA电镜图 第一节 抗体的结构 三、J链和分泌片 2. 分泌片 (secretory piece, SP) 由黏膜上皮细胞合成，为SIgA的重要组成部分。 主要作用：①介导IgA二聚体从黏膜下转运至黏膜表面；②保护SIgA不被黏膜表面的蛋白酶水解。 SIgA 分泌片 分泌型IgA的形成和转运 第一节 抗体的结构 第一节 抗