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骨髓血管内皮祖细胞的分离培养及分化鉴定 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：骨髓血管内皮祖细胞的分离培养及分化鉴定 1 1 材料与方法 2 2 结 果 4 3 讨 论 4 文2：山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定 5 1材料与方法 6 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 骨髓血管内皮祖细胞的分离培养及分化鉴定 文1：骨髓血管内皮祖细胞的分离培养及分化鉴定 【Abstract】 Objective To study the method of isolation ，cultivation of endothelial progenitor cells from BALB/c mice bone marrow and identification of its differentiation，to establish cytological foundation for vicariousness therapy of ischemic The endothelial progenitor cells were isolated by injector perfusion method from bone marrow of BALB/c mice，and induced by VEGF and bFGF，morphology method was used to observe cells growth status, anti CD34 antibody was used to test the specificity of endothelial progenitor cells，antivWF antibody and antieNOS antibody were used to identify cell′s differentiation by immunocytochemistry The status of endothelial progenitor cell from BALB/c mice bone marrow was adherence culture in vitro，and it was induced by cytokine to differentiate endothelial cell with typical morphologic and expressing tissuespecific protein. Conclusio The endothelial progenitor cell can be isolated from BALB/c mice with adherent proliferation status and has potential to differentiation. 【Key words】 Endothelial progenitor cells;Endothelial cells;Spinal cord;Cell differentiation 骨髓中的血管内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells，EPCs)可以游走到创伤组织参加新血管形成，并能分化为内皮细胞(Endothelial cells，ECs)，促进局部血管生成和血管新生。目前已有研究者将EPCs用于治疗缺血性疾病，并取得了良好的治疗效果，具有再生和分化能力的EPCs已逐渐成为治疗血管系统疾病的理想细胞材料〔1〕。但是，目前EPCs主要通过外周血进行提取，这种方法获取的细胞数量较少，而骨髓来源的EPCs研究报道不多。本研究从BALB/c小鼠分离骨髓源性EPCs，在体外进行培养扩增，诱导其分化，建立一套完整的骨髓源性EPCs的分离、培养、诱导分化和鉴定的方法，为其作为细胞材料治疗血管创伤方面提供依据。 1 材料与方法 实验材料 BALB/c小鼠，6～8 w龄，雌雄不限，由吉林大学医学部基础实验动物部提供，SPF级;DMEM /F12 (1∶1)培养基、胎牛血清由Gibco公司提供;内皮细胞生长因子( epidermal growth factor，EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)由Sigma公司提供;纤维连接蛋白(FN)由北京鼎国公司提供;抗CD34抗体、抗vWF抗体、抗eNOS、SP免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒由博士德公司提供;6孔一次性培养板、10 cm一次性培养皿由Costa公司提供。 EPCs的分离与培养〔2〕 BALB/c小鼠断颈