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实验七:绿茶加工过程中叶绿素的变化Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipisicing elit.一、实验目的 通过本实验,掌握叶绿素的测定方法,了解绿茶加工过程中叶绿素的转化情况。二、实验原理 叶绿素是一种脂溶性色素,可用丙酮提取,溶于丙酮的茶多酚及其他杂质,可用乙醚进一步提取分离除去。所获得的叶绿素提取液在650-660nm波长处有特异性吸收光谱,吸光度与浓度符合朗伯-比尔定律。对照标准曲线可计算出叶绿素含量。 叶绿素由叶绿素a和叶绿素b组成,它们在400-700nm有各自特征吸收波长。利用等吸光点波长处可以测定其总含量,选择叶绿素a和叶绿素b的合适吸收波长,测定两波长的总吸光度,列出联立方程,求解,就可得到叶绿素a和叶绿素b的含量,预先不需a、b两组分化学分离。本实验采用乙醚浸提液比色法测定叶绿素a和叶绿素b。三、用具和材料 1.用具 电子天平、分光光度计、烘箱、抽滤装置、分液漏斗、研钵、100mL容量瓶等。 2.材料 绿茶加工过程各工序的茶叶在制品、丙酮、碳酸钙、石英砂。三、用具和材料 电子天平分光光度计烘箱三、用具和材料 研钵抽滤装置分液漏斗三、用具和材料 丙酮石英砂100mL容量瓶碳酸钙四、方法与步骤1.取样:茶鲜叶、茶叶加工在制品或成品茶5g(测定含水率后,折算成干质量),加入50mL丙酮中密封备用。2.叶绿素的提取:存放于50mL丙酮中的样品倒入研钵中,加0.1 g CaCO3及适量石英砂研磨成匀浆,然后减压抽滤。残渣转移至研钵中,加入适量80%丙酮继续研磨抽提至无色,最后用少量80%丙酮洗涤残渣、漏斗及研钵、将洗涤液、滤液用80%丙酮定容至100m备用。3.测定:取上述叶绿素提取液4mL,转入比色皿,以80%丙酮为对照,分别在波长663nm、645nm处测吸光度值。 四、方法与步骤五、实验结果计算 茶叶叶绿素含量计算公式 Ca=12.7×A663-2.59×A645 Cb=22.9×A645-4.67×A663 Ct=Ca+Cb=8.04×A663+20.3×A645式中 Ct—叶绿素总质量浓度,mg/mL Ca—叶绿素a质量浓度,mg/mL Cb—叶绿素b质量浓度,mg/mL再根据稀释倍数分别计算出每克干茶叶中叶绿素的含量。 六、注意事项 提取样品叶绿素前,样品应用丙酮密封备用。
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