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眼睑基底细胞癌组织中Survivin的表达及统计浅析 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：眼睑基底细胞癌组织中Survivin的表达及统计浅析 1 1 材料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：食管癌组织中Survivin和Ki67的表达及临床意义 5 1 MATERIALS AND METHODS 6 2 RESULTS 8 3 DISCUSSION 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 眼睑基底细胞癌组织中Survivin的表达及统计浅析 文1：眼睑基底细胞癌组织中Survivin的表达及统计浅析 眼睑基底细胞癌(basalcell carcinoma，BCC)是最常见的眼睑恶性肿瘤，约占眼睑恶性上皮性肿瘤的85%～95%[1]。研究显示多种癌基因的异常表达在眼睑BCC的发生发展过程中有重要作用，研究癌相关基因抗原在BCC发生、发展及转移机制中的作用，对于揭示BCC的生物学行为及探索有效的防治方法有重要意义。 1 材料与方法 材料 标本来源 收集武汉市中心医院和武汉大学中南医院病理科 2002 ～ 2009 年手术切除及活检的眼睑基底细胞癌( basalcell carcinoma，BCC)标本共20例，另取癌周围正常组织5例作对照。所有标本均经10%甲醛固定， 常规HE染色，光镜观察，病理检查确诊。 主要试剂 即用型鼠抗人Survivin单克隆抗体(北京中山生物技术有限公司);超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒(福州迈新生物有限公司);DAB显色试盒及多聚赖氨酸(北京中山生物技术有限公司) 主要仪器 YWY781型医用微波仪，250W，50Hz，浙江临安电子器材厂生产;家用高压锅。 方法 常规HE染色 取材、固定、脱水、透明、切片和HE染色。 免疫组织化学SP法检测Survivin抗原 主要步骤： ① 4μm组织切片常规脱蜡至水后， PBS(pH )漂洗3×3 min;② 抗原修复(柠檬酸缓冲液微波抗原修复法)，室温自然冷却后， PBS(pH )漂洗5×3 min;③ 滴加3%过氧化氢，37℃湿盒孵育10min以抑制内源性过氧化物酶活性， PBS(pH )漂洗3×3 min;④正常羊血清37℃湿盒孵育10min以减少非特异性背景;⑤ 甩去多余血清，分别滴加一抗，4℃孵育过夜， PBS(pH )漂洗3×5 min;⑥ 滴加生物素标记的二抗37℃湿盒孵育10min， PBS(Pp )漂洗3×3 min;⑦ 滴加链霉素抗生物素蛋白-过氧化物复合物37℃湿盒孵育10min， PBS(pH )漂洗3×3 min;⑧ 滴加新鲜配置的DAB显色液显色，光镜下控制反应时间(约3～5 min)，自来水冲洗终止反应; ⑨ 苏木素复染，流水冲洗，1%盐酸酒精分色数秒，流水冲洗，%氨水返蓝;⑩ 梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片并镜检;用PBS代替一抗作为阴性对照。 免疫组织化学结果判断 Survivin抗原以细胞浆或胞核出现棕黄色颗粒为阳性反应。阴性对照除细胞核染成蓝色外，细胞浆或胞核内无棕黄色反应物。 采用HPIAS2000高清晰度彩色病理图文报告管理系统(同济千屏影像公司)对细胞浆或胞核的表达进行定量分析，每张切片随机选取5个完整而不重叠的高倍镜视野(×400)，测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积，计算阳性面积率(阳性面积率=单位面积中阳性反应的总面积/单位面积中细胞的总面积×100%)。以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。 统计学处理 数据以均数±标准差表示，用SPSS11. 5 软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q) 检验，检验水准α为。 2 结果 HE染色 瘤体由基底样细胞组成，细胞核大，呈圆形或椭圆形，胞浆为嗜碱性，可见少量核分裂相。瘤体周边细胞呈栅栏状排列。肿瘤周围结缔组织增生，有较多纤维母细胞，产生胶原纤维包绕在瘤体周围。 Survivin的表达 基底细胞癌组织中可见癌细胞胞浆内棕黄色颗粒较多，Survivin表达呈阳性;癌旁组织的细胞胞浆内可见极少量的棕黄色颗粒，Survivin表达呈阴性。图像分析结果显示：眼睑基底细胞癌Survivin表达的平均光密度为±，癌旁组织Survivin表达的平均光密度为± ; 眼睑基底细胞癌Survivin表达的阳性面积率为±;癌旁组织中Survivin表达的阳性面积率为±。经单因素方差分析，组间有显著性差异(P 3 讨论 基底细胞癌是眼睑最常见恶性肿瘤，常发生于长期暴露于阳光下的中年以上的人群，男性略多，好发于