慢性牙周炎与种植体周围炎牙周组织中巨噬细胞极化情况及关系对比分析.docVIP

慢性牙周炎与种植体周围炎牙周组织中巨噬细胞极化情况及关系对比分析 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：慢性牙周炎与种植体周围炎牙周组织中巨噬细胞极化情况及关系对比分析 2 1、病例选择 2 2、主要试剂及仪器 3 3、牙周组织的获取 3 4、免疫组织化学染色 3 5、组织RNA的提取及qRT-PCR 4 6、统计学方法 5 1、牙周组织样本及巨噬细胞表达的比较 6 2 、M1、M2型巨噬细胞表达的比较 6 3、 M1、M2型巨噬细胞相关细胞因子表达的比较 6 文2：语文和英语阅读策略关系对比分析 9 一、语文阅读策略与英语阅读策略之比较 9 （一）从语言学习过程看语文、英语阅读策略的关系 9 （二）从阅读材料的选择看语文阅读策略和英语阅读策略的关系 10 二、语文阅读策略与英语阅读策略之比较研究的意义 11 三、结语 12 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 14 正文 慢性牙周炎与种植体周围炎牙周组织中巨噬细胞极化情况及关系对比分析 文1：慢性牙周炎与种植体周围炎牙周组织中巨噬细胞极化情况及关系对比分析 慢性牙周炎(chronic paradentitis，CP)是一种伴有牙槽骨破坏的炎症性疾病。巨噬细胞可分为经典活化的巨噬细胞(M1巨噬细胞)和选择性活化(M2巨噬细胞)，具M1/M2比值的失调可能是许多炎症性疾病(如动脉粥样硬化、肥胖、纤维化等)发病机制中的一个重要标志[1，2，3]。有关M1/M2平衡极化状态在牙周和种植体周围炎(peri-implantitis，PI)组织中的变化水平，可以反映疾病炎性程度的指标，均有可能成为CP和PI的反映指标，因此，从病变周围组织中寻找CP和PI发生、发展的标志物备受国内外学者青睐。有研究对CP患者巨噬细胞表型和相关炎症因子进行分析，结果表明巨噬细胞极化状态与CP密切相关，炎性M1巨噬细胞数目与种植周围炎的发生、发展具有正相关性[4，5，6，7]。国外已有研究表明M1巨噬细胞在具有炎症的种植体周围软组织中的表达具有统计学意义，但是对CP与PI二者之间M1/M2极化的关系，目前尚未见报道。 资料和方法 1、病例选择 收集广州医科大学附属第二医院，重庆医科大学附属口腔医院，中国科学院大学深圳医院三家医院口腔颌面外科手术患者牙周组织样本74例，24例诊断为CP患者牙周组织和28例诊断为PI患者牙周组织，另选取22例因正畸治疗需要拔除健康牙齿的健康牙周组织作为对照组(NC组)，年龄31～63岁。纳入标准:①CP组需满足CP的诊断标准，且未接受系统性牙周治疗;②PI组需满足PI的诊断标准;③NC组无临床牙周炎症状;④各组均无影像学牙槽骨吸收现象;⑤口腔内天然牙不少于18颗;⑥患者具有较好的依从性;均行研究前沟通，根据自身意愿和实际病情接受治疗方式，并签署知情同意书。排除标准:①存在其他原因影响牙周健康的病变;②存在神经系统并发症、精神疾病或恶性肿瘤者;③拒绝或中途主动退出或失访者;④因自身认知能力差、免疫能力差等原因而无法耐受研究。所有参与者均有完整的病史和牙科病史。本研究经本院伦理委员会批准进行。 2、主要试剂及仪器 荧光定量PCR使用的10×buffer、dNTP mixture、Evagreen、Taq酶等购自TaKaRa公司(日本);过氧化氢、水饱和酚以及所有PCR引物购自生工生物工程(中国)股份有限公司;-80℃超低温冰箱(SANYO公司，日本);荧光定量PCR仪(ABI公司，美国);正置荧光显微镜(TE2000-U)(Nikon公司，日本);RM2235石蜡切片机(Leica公司，德国);微量移液枪(Eppendorf公司，德国);酶标仪及低温高速离心机(Thermo Scientific公司，美国);超纯水仪(Millipore公司，美国);其他常规化学试剂(南京晚晴化玻仪器有限公司，中国) 3、牙周组织的获取 CP组来源于因严重牙周组织破坏而拔除牙的牙周组织;PI组来源于因严重牙周组织破坏而拔除种植体周围的牙周组织;NC组来源于健康牙周组织。所有样本大小相同，一半的切除样本提取总RNA进行qRT-PCR分析，其余进行免疫组织化学检查。 4、免疫组织化学染色 通过石蜡包埋及切片，免疫组化等评估牙周组织巨噬细胞表达情况;通过免疫组化对组织中F4/80阳性细胞的含量进行分析。对3组牙周组织进行石蜡包埋及切片，脱蜡水化后置入柠檬酸钠抗原修复液中，100℃沸水浴修复15 min。待切片在室温中自然冷却后用PBS液洗5 min×3次。将切片放入3% H2O2溶液中，室温孵育10 min，以阻断内源性过氧