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高效液相色谱法测定卡马西平血药浓度 卡马西平（ichamazepi，cbz）是抗癫痫药物常用的药物。这是癫痫发作和三叉神经痛的首选药物。卡马西平安全血药浓度范围窄 (4~12μg·m L 1 仪器和试剂 1.1 仪器 Waters高效液相色谱仪 (美国Waters公司) , C 1.2 色谱药物的色谱由 卡马西平、地西泮由中国药品生物制品检定所提供;甲醇 (TEDIA色谱纯) ;乙腈 (TEDIA色谱纯) ;乙酸乙酯 (国药集团化学试剂有限公司, 分析纯) ;健康人空白血清;纯化水。 2 方法和结果 2.1 条件1 色谱柱:Symmetry C 2.2 试剂的制备 2.2.1 卡马西平备液 精密称取卡马西平20mg至10m L容量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 得2mg·m L 2.2.2 标准溶液 2.3 乙酸乙酯法 精密量取血清样品100μL, 加入内标地西泮甲醇溶液10μL, 漩涡振荡30s混匀, 加入乙酸乙酯5m L, 漩涡振荡3min, 静置5min。3000r·min 2.4 内标地西材料的保留时间 在本实验条件下, 卡马西平峰与内标峰能很好的分离, 血清中无明显干扰峰。CBZ和内标地西泮的保留时间分别为4.2min, 6.3min。色谱图 (见图1) 。 2.5 标准曲线 将卡马西平储备液用空白血清稀释成浓度分别为1.25、2.5、5、10、20、40μg·m L 2.6 精密度测试 分别配制CBZ的质控样品3份, 使血清中CBZ终浓度分别为20、10和5μg·m L 2.7 返回率测试 取空白血清100μL数份, 分别加入相应的对照品, 依照标准曲线各项各项方法制备样品血药浓度为20、10和5μg·m L 3 讨论 3.1 检测波长的选择 文献报道的检测波长有220nm波长 3.2 乙醇萃取剂 曾用2种萃取剂进行比较后发现, 乙醚和乙酸乙酯的提取效率相当, 在挥干过程中乙醚具有明显的优势, 但因其具有高挥发性, 提取回收率较乙酸乙酯低, 而且采用乙醚作为萃取剂具有易生成过氧化物杂质的缺点 3.3 硝西料和苯巴比妥 在整个试验过程中, 曾3次改变内标。首先选择的是氯硝西泮和苯巴比妥, 结果峰形很好但保留时间与卡马西平太近, 改变流动相无法解决;换为地西泮后, 峰形很好, 能与卡马西平很好的分离, 且避开了杂质峰的干扰。 3.4 测定波长的选择 密称取地西泮5mg至25mL容量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 得0.2mg·mL 在本提取条件和色谱条件下, 仅需改变波长内标, 即可测定苯巴比妥、地西泮、氯硝西泮和卡马西平。