解酒养肝散保肝作用及保肝作用机制研究.docxVIP

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解酒养肝散保肝作用及保肝作用机制研究 急性酒精中毒也被称为酒精,分为三个阶段:兴奋、共济失调和昏迷。酒精在人体内的分解代谢途径主要有三条:肝脏、皮肤和呼吸系统,90%以上酒精通过肝脏的酶系统进行氧化代谢 解酒养肝散是广州市海珠区中医医院马哲河主任医师三十余年经验总结,临床用于醒酒疗效显著,具有一定的研发价值。本研究拟观察解酒养肝散的醒酒功效并探讨其醒酒机制及保肝作用机制。 1 材料和方法 1.1 动物 KM小鼠140只,SPF级,体质量18~22 g,购于中山大学(实验动物中心东校园),许可证号:SCXK(粤)2016-0029。 1.2 试剂、实验设备 解酒养肝散中药样品由广州市海珠区中医医院提供,批号药物浓度以中药生药量计算。海王牌金樽片,卫食健字(2002)第0396号,深圳市海王健康科技发展有限公司生产,批号中药分别给予的剂量为20 m L/kg,按体质量换算相当于60 kg成人服用120 m L/d的10倍;海王金樽小鼠给予剂量为99 mg/kg,按体质量换算相当于60 kg成人每日服用量9 g的66倍。北京二锅头酒(56℃),保定市大红门酒业有限公司生产,生产许可证:SC11513060700903;氯化钠,AR级,天津市百世化工有限公司生产,批号GSH测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号T-SOD测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号MDA测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号CAT测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号ADH测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号ALDH测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号TP试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司生产,批号:180761;AST试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司生产,批号:180811;ALT试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司生产,批号:180841;三氯乙酸,分析纯,广东光华化学厂,批号石油醚,分析纯,天津市富宇精细化工有限公司,批号无水乙醇,色谱纯,天津市大茂化学试剂厂,批号叔丁醇,GC级,上海麦克林生化科技有限公司,批号:有机系微孔滤膜,0.22μm,天津津腾实验设备有限公司;高纯氦气,99.999%,广气气体有限公司。 1.3 紫外分光光度计和设备 BS110S电子天平,北京塞多利斯天平有限公司;ACS-1A1电子计量秤,深圳爱华衡器有限公司生产;YLS-4C转棒式疲劳仪,济南益延科技发展有限公司;UV2102-PC可扫描紫外可见光分光光度计,龙尼柯(上海)仪器有限公司;TG型高速离心机,上海安亭仪器厂;GS-15R型离心机,德国BECNIHAN;IKA-T18组织匀浆机,德国IKA公司;DK-600型水浴锅,上海精宏实验设备有限公司;FAITH-1000型全自动生化仪,南京劳拉电子有限公司;Agilent 7890A-5975C气质联用仪,美国安捷伦公司;RTX-1701石英毛细管柱,30 m×0.25 mm,0.25μm,RESTEK公司。 1.4 组、药物组和实验方法 1.4.1 模型小鼠造模及数据获取 选取健康KM小鼠80只,体质量18~22 g,雌雄各半,检疫3 d。小鼠先进行筛选,将小鼠置于YLS-4C转棒式疲劳仪,以20 r/min速度旋转,选取能够连续在转棒上行走1 min以上不掉下来的即为合格;然后将小鼠随机分成6组,分别为模型对照组、蒸馏水对照组、A组、B组、C组和海王金樽对照组,每组不少于10只,雌雄各半。实验前小鼠禁食12 h,各组小鼠空腹灌胃给予北京二锅头酒(56℃)0.15 m L/10 g,醉酒模型成功表现为翻正反射消失,呆滞昏睡等,实验中剔除对二锅头酒不敏感的小鼠(即实验过程中均未能翻正反射消失的小鼠)。灌胃给予白酒30 min后,A,B,C组小鼠分别灌胃给予药液0.2 m L/10 g;海王金樽对照组小鼠灌胃给予剂量为99 mg/10 g、蒸馏水组灌胃给予蒸馏水0.2 m L/10 g、模型对照组不予给药处理。给予二锅头白酒后开始计时,观察并记录造模以及给药期间小鼠有无死亡、呕吐、乏力等症状,记录小鼠翻正反射消失时间和翻正反射恢复时间,计算小鼠醉倒率、醉酒潜伏期和醉酒维持时间。实验结束后,各组进行统计学处理并比较组间差异。 1.4.2 检测肝脏生化指标 选取健康KM小鼠60只,体质量18~22 g,雌性,检疫3 d。小鼠随机分成3组,分别为蒸馏水对照组、A组、海王金樽对照组,每组20只。用北京酿酒总厂生产的100 m L装56°红星二锅头0.15

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