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蒸汽爆破处理的玉米秸秆饲料饲用安全性研究 木纤维是植物残留物的主要成分，是世界上最大的可支配能源材料。其中，高羊茅含量是第一位。吉林省每年生产玉米超过2000万吨。因此，通过物理处理和生物技术的转化，生产适合各种反刍动物的辅助饲料对促进农业和畜牧业的发展具有极其重要的意义和广泛的应用前景。虽然吉林省具有丰富的玉米秸秆资源,但目前利用的并不理想,传统的利用菌株发酵生产的单细胞蛋白,由于菌体细胞壁成分难于消化,同时菌株对玉米秸秆的转化率较低等原因,并不十分适合大规模工业化生产。因此,采用有效地途径,切实提高玉米秸秆的可饲用性,就受到了人们的极大关注。在这一过程中,利用蒸汽爆破和微生物酶解技术处理玉米秸秆,降低其纤维素的结晶度,提高天然秸秆饲料的可饲性,被认为是提高天然秸秆饲用价值最有效途径之一 1 材料和方法 1.1 玉米秸秆的制备 将玉米秸秆风干料与水1:1混合,加压至1.0 MPa维持20 min,瞬时放罐得汽爆的玉米秸秆。将蒸汽爆破处理后的玉米秸秆按1:10加入蒸馏水进行水提,得汽爆玉米秸秆的水提液。对此提取液进行可安全性研究及可溶性寡糖的含量分析 1.2 饲料安全研究方法 1.2.1 急性中毒试验 按照GB15193.1-94食品安全性毒理学评价程序和方法 1.2.2 大鼠骨髓细胞的微标签 参考黄河浪的检测方法 1.2.3 大鼠骨髓细胞染色体变异试验 按照黄幸纾的检测方法 1.2.4 大鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷的回复突变试验 按照纪云晶的检测方法 1.3 蒸汽破裂后玉米稻草的酶分解处理 1.3.1 试验消毒 产生纤维素酶的毛霉菌株Sb-27为东北师范大学生命科学学院微生物实验室分离鉴定并保存的菌株。 1.3.2 纤维素酶固体发酵和生长 培养基为85%玉米秸秆+15%麸皮及Mandel 1.3.3 还原糖的制备 纤维素酶的固体培养物用300 mL的pH 4.8的0.15 mol/L的醋酸缓冲液溶液浸泡2 h,过滤离心得粗酶液。采用DNS法测定酶活 CMC酶活单位:取1 mL含1.1 mg/mL CMC-Na的HAc-NaAc(pH4.8)缓冲液,加适量的粗酶液,50℃保温15 min,DNS法测定还原糖;以1 min产生1μmol还原糖所需酶量为1个单位。 FP酶活:取50 mg滤纸条,加入0.9 mLHAcNaAc缓冲液(pH4.8),加适量的粗酶液,50℃保温15 min,DNS法测定还原糖;以1 min产生1μmol还原糖所需酶量为1个单位。 2 结果与分析 2.1 可溶性纤维寡糖组 发酵生产的纤维素酶的CMC酶酶活性为324 IU/g,FP酶酶活为14.6 IU/g。经汽爆和酶解共产生了11.52%的可溶性纤维寡糖,其中,蒸汽爆破产生了7.92%的可溶性寡糖,酶解过程产生了3.60%的寡糖。与此同时,天然玉米秸秆未检测出寡糖。 2.2 蒸汽爆干处理中玉米稻草中毒的结果 2.2.1 小鼠不良反应观察结果 汽爆后的玉米秸秆提取液为褐色,对该提取液进行急性毒性试验。试验开始时小鼠活动减少,稍有安静,3 h后恢复正常,连续观察7 d,小鼠无不良反应。试验结果证明:汽爆玉米秸秆提取液对小鼠口服最大的允许浓度为18 g/kg。根据急性毒性剂量分级标准,玉米秸秆汽爆水解液属无毒级。 2.2.2 两组微核出现率的比较表1 小鼠骨髓细胞微核试验结果见表1。 汽爆玉米秸秆的水提液各剂量组中微核出现率与对照组相比无显著性差异(P0.05)。由此可以得出:在本试验条件下,蒸汽爆破处理的玉米秸秆水提液未诱发小鼠骨髓细胞微核的增加。 2.2.3 小鼠骨髓细胞畸变试验 小鼠骨髓细胞染色体畸变试验结果见表2。 汽爆的玉米秸秆水提液各剂量组小鼠骨髓细胞畸变率与对照组相比较无显著性差异(P0.05)。因此,在本试验条件下蒸汽爆破处理的玉米秸秆水提液对小鼠骨髓细胞染色体无诱变作用。 2.2.4 鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验 鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷回复试验结果见表3。 各剂量组中鼠伤寒沙门氏菌回复突变率与对照组相比差异不显著(P0.05)。在本试验条件下,蒸汽爆破处理的玉米秸秆水提液未见有诱变性。 3 玉米秸秆的汽爆试验 在采用秸秆进行动物的饲养过程中,秸秆材料的预处理是提高饲料的适口性及消化性的关键措施 在蒸汽爆破的基础上,为了进一步增加玉米秸秆饲料的饲用价值及营养价值,我们采用纤维素酶对蒸汽爆破的玉米秸秆进行了酶解,经汽爆和酶解后所产生的玉米秸秆产品中的可溶性寡糖成分发生了较大的变化,共产生了11.52%的可溶性寡糖。另据体外研究试验表明 采用蒸汽爆破和纤维素酶解工艺生产的易消化、高营养、无毒副作用的玉米秸秆饲料是一种原料来源广泛、应用潜力巨大并具有广阔市场的生物秸秆饲料,它将对牛羊等反刍动物的饲养具有重要的生产实践意义。