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多环芳烃对仿刺参早期发育阶段原肠胚的急性毒性效应 多环芳烃（pahs）是环境中常见的有机污染物，广泛分布于我国南部和北部的海水和海上沉积物中。 仿刺参 (Apostichopus japonicus) , 属海参纲, 棘皮动物门。全身长满肉刺, 以海底藻类和浮游生物为食, 广泛分布于世界各大海洋中, 是我国重要的海水养殖经济品种, 具有提高记忆力、延缓衰老, 预防动脉硬化以及抗肿瘤等作用 1 材料和方法表面活性剂 1.1 储备液的配制 实验仿刺参原肠胚购自大连海宝渔业有限公司, 为受精24 h后的原肠期胚胎, 体长约280μm。实验海水为大连黑石礁海域的砂滤海水, 定期换水, 每24 h投喂1 m L密度为1×10 储存液配制:称取一定量的苯并[a]芘、3-甲基菲、惹烯和2-甲基蒽固体, 用丙酮作助溶剂溶解, 配制成高浓度的储备液, 实验时根据需要, 向实验海水中添加不同体积的储备液稀释至实验所设定的不同药物浓度。 1.2 实验方法 本实验在10 m L的试管中进行, 每个试管中胚胎的密度为2～3个·m L 1.3 半致死浓度和安全浓度计算 采用Excel 2010软件对实验数据进行处理, 求出存活率和4种多环芳烃浓度对数的回归方程, 分别计算每组的半致死浓度和安全浓度。 半致死浓度计算方法采用概率单位法计算, 以寇氏法 (Karber) 求半数致死浓度 (LC LC 公式中:X 利用SPSS 19.0分析软件对实验数据进行单因素方差分析, 分析多环芳烃组和对照组之间的差异, P0.05表示差异显著。 2 结果结果 2.14 仿刺参原肠胚的存活率 图1表示各组实验的存活率以及显著性差异。由图1可知, 在实验进行24, 48 h时, 4组仿刺参原肠胚存活率均较高。实验72 h时, 苯并[a]芘50μg·L 2.24 表观半致死浓度及安全浓度 4种PAHs对仿刺参原肠胚在24、48、72、96 h的表观半致死浓度及安全浓度结果详见表1。苯并[a]芘对仿刺参原肠胚在24、48 h的半致死浓度分别为294.4、225.64 mg·L 3 对鱼类胚胎和仿刺参原肠胚的毒性作用机理 多环芳烃 (PAHs) 有机污染物在环境中, 主要来源于有机物和化石燃料的不完全燃烧, 已被联合国环境规划署 (UNEP) 列入持久性有毒化学污染物 (PTS) 名录 对PAHs致毒机理研究发现, PAHs对鱼类胚胎发育的影响包括:卵黄囊和心包水肿、出血、心脏功能紊乱、结合芳基烃受体 (AHR) 和诱导CYP1A、后代突变和遗传性变化、颅面和脊柱畸形、神经细胞死亡、贫血、生长抑制和游泳障碍等 仿刺参原肠胚在暴露于PAHs后其存活率随暴露时间的延长和暴露浓度的升高而显著下降, 存在明显的剂量-效应关系, 暴露时间越长, PAHs浓度越高对仿刺参原肠胚的毒害作用越大。而PAHs对仿刺参原肠胚产生毒性作用的机理是否与鱼类胚胎发育或者其他海洋无脊椎动物的致毒机理一致, 有必要进一步深入研究。 LogLC SC=48 h-LC